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中原1虎

木虫 (正式写手)

科研界的黄金矿工

[求助] 抗真菌活性实验固体平板有活性,但液体培养却没活性

近期做了一个化合物的抗病原真菌活性实验,在平板上可看到有很强的活性,菌丝生长的抑菌圈明显。但用液体培养的方法测活性(药物浓度已经比较高了),却看不到该化合物对菌丝的液体生长有明显抑制作用。请教大家如何解释这种现象,这个化合物到底有没有抑菌活性?若有,如何使它在液体状态下也对真菌生长保持抑制?
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robert-RBT

木虫 (小有名气)

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感谢参与,应助指数 +1
中原1虎: 金币+1, ★★★很有帮助 2013-04-19 00:34:25
液体培养真菌,生长较快,需要的抑制浓度也较大。可以降低接种量,在不同培养阶段观察、测定。也许会有差别。差别可能表现在萌发速度、生物量以及菌丝形态结构等方面。
2楼2013-04-19 00:08:26
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中原1虎

木虫 (正式写手)

科研界的黄金矿工

引用回帖:
2楼: Originally posted by robert-RBT at 2013-04-19 00:08:26
液体培养真菌,生长较快,需要的抑制浓度也较大。可以降低接种量,在不同培养阶段观察、测定。也许会有差别。差别可能表现在萌发速度、生物量以及菌丝形态结构等方面。

你的意思是这个化合物还是有活性的。液体培养时降低接种量,你所谓的不同培养阶段具体是指的是什么?多长时间用分光光度计测一次比较好呢?
3楼2013-04-19 00:32:31
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czfscf

金虫 (正式写手)

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感谢参与,应助指数 +1
中原1虎: 金币+1, 有帮助 2013-04-19 11:49:14
或者你这个东西它是挥发性的 或者不容的那
Ecological Genomics;the scientific walking hormone
4楼2013-04-19 08:59:07
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robert-RBT

木虫 (小有名气)

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★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
中原1虎: 金币+10, ★★★很有帮助 2013-04-19 23:54:04
引用回帖:
3楼: Originally posted by 中原1虎 at 2013-04-19 00:32:31
你的意思是这个化合物还是有活性的。液体培养时降低接种量,你所谓的不同培养阶段具体是指的是什么?多长时间用分光光度计测一次比较好呢?...

不知道你培养的真菌是什么类型,如果是丝状真菌,接种的是孢子悬浮液,可以从孢子萌发开始观察,但对生长的影响不能用OD值来衡量,可以测生物量,方法有很多。如果是酵母类单细胞真菌,可以用血球计数板计数细胞个数。不同培养阶段就是在培养的不同时间点取样观察。真菌有时候虽然在生长,但很不正常,表现出结构或形态的异常以及培养过程中出现自溶等现象。不能肯定有效果,但抑菌能够用平板做出效果,液体也应该没有问题。还有一个要注意培养过程中不能有污染。抑菌平板也要观察仔细,有时候有少量的细菌污染即可以达到很好的抑菌效果。
5楼2013-04-19 20:54:17
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中原1虎

木虫 (正式写手)

科研界的黄金矿工

引用回帖:
5楼: Originally posted by robert-RBT at 2013-04-19 20:54:17
不知道你培养的真菌是什么类型,如果是丝状真菌,接种的是孢子悬浮液,可以从孢子萌发开始观察,但对生长的影响不能用OD值来衡量,可以测生物量,方法有很多。如果是酵母类单细胞真菌,可以用血球计数板计数细胞个 ...

是丝状真菌。但为什么不能用OD值来测量呢?因刚入行,不太懂,请指教。
6楼2013-04-19 23:56:11
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robert-RBT

木虫 (小有名气)

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引用回帖:
6楼: Originally posted by 中原1虎 at 2013-04-19 23:56:11
是丝状真菌。但为什么不能用OD值来测量呢?因刚入行,不太懂,请指教。...

液体培养丝状真菌,实际上是很多小的菌丝团,形成的是不均一的混合物。你在显微镜下观察后就会明白。只有均一的液体才能够用OD值来测。
7楼2013-04-20 01:53:56
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