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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 菌落计数那叫一个烂啊
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千里幽寻

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
在我们实验室，菌落计数一般是两个人一起做，获取平均值，或用其中一人。一个人做的话没有可比性，因为你每一步的操作都是相似的。
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Iamaslowwalker,butIneverwalkbackwards.
11楼2013-04-18 20:37:35
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颜英

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhangxingc at 2013-04-18 09:17:47
按楼主描述的情况，过程没有错，挑不出毛病
重复一遍试试，说不定是偶然失误造成的

我做了很多次了都是这个样子
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12楼2013-04-18 22:13:43
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lmqml24

禁虫 (小有名气)
★
感谢参与，应助指数 +1
zhangxingc: 金币+1, 欢迎常到微生物版 2013-04-19 08:38:33
本帖内容被屏蔽
13楼2013-04-19 00:48:33
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monky

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
应该是计数过程中存在污染，建议实验过程中的器皿、无菌水等进行严格的灭菌，灭菌后要进行烘干，倒好的平板要恒温培养1天再用，实验要在无菌室或者超净工作台进行，必要时做空白对照。
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14楼2013-04-19 10:15:53
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郁闷的重复

金虫 (正式写手)
我以前做也出现没有梯度的情况，这种情况我认为是菌体没完全打散，有人说用超声波打散几分钟然后再依次稀释。
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Shutup,sayNO!
15楼2013-04-19 14:18:43
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zdwxxw

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1.首先就是枪头要换，否则梯度可能会不明显（因为稀释一般从高到低）；
2.每次稀释都要混匀，最好放在漩涡混合器上振一会；
3.我觉得倾倒法不如涂布法容易混匀，你不妨试试涂布法，我觉得涂布法应该也可以用，只要严格无菌操作就可以了。
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踏踏实实做好自己，其他的事与你无关。
16楼2013-04-19 16:54:14
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woaiwoma2016

铜虫 (初入文坛)
你倾注时取1ml试试，还有你为什么要离心后定OD。而不直接用液体培养基稀释
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我爱生活
17楼2013-04-19 22:00:41
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zhangchao3206

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by xiyang139 at 2013-04-18 12:11:36
可能浓度还是太高 再稀释下

再看看倾注法倒平皿的操作
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18楼2013-04-20 13:25:18
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zhangchao3206

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
9楼: Originally posted by devil小斌 at 2013-04-18 18:39:12
实在不行就用血球计数板吧！！计数的，用涂板的话误差很大，别人说是用浇柱平板法好像更好一点~

血球计数板误差更大，不建议
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19楼2013-04-20 13:26:44
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馨沁

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可能是污染的原因 你操作过程时间太长 建议你不用调OD值，挑取一环直接接入液体培养基中，培养18小时后吸取1mL至9mL生理盐水中 一直做到-8次方，基本上-6的就在100左右
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20楼2013-04-20 21:39:26
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