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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 请再次帮看下此电泳图
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jkamm

金虫 (正式写手)

[求助] 请再次帮看下此电泳图

请帮看下这次电泳图，未见条带的先不管，只看有带的内个样。
DNA的PCR产物电泳。刚换了buffer。
100V，恒压、恒流，电泳时间30分。
可见条带凸凹不平，见的拖尾，问题在那？本人刚接触分子这块学习。请前辈赐教，谢谢！！

I3-H3  2013-04-17 20 小时 17 分钟.jpg



F1-I2 2013-04-17 20 小时 03 分钟.jpg
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jkamm

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1楼 2013-04-17 21:40:38
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njzyydxgw

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你的这个问题我之前也遇到过，有人说胶的问题，缓冲液的问题，电压的问题等等。我同意上述的观点。一是琼脂糖在加热的时候溶解的不完全，一般要沸腾3次。第二个缓冲液的问题：TBE和TAE都可以，但是TAE在大分子量时分离效果好于TBE，缓冲液不能配制时间过长。第三个电压的问题，不超过7V/cm。如有问题，欢迎讨论。
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我行，我成功
13楼2013-04-19 14:38:43
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堍仔

至尊木虫 (文坛精英)

优秀版主

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
1949stone: 金币+1, 鼓励 2013-04-19 07:41:01
Maker都有拖带，说明不是胶的问题就是电压问题哈，电压太大了就会这样，但是你才100V，就有点奇怪了
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2楼2013-04-17 21:42:40
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yiloutingyu

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
1949stone: 金币+1, 鼓励 2013-04-19 07:41:12
如同楼上说的问题，胶没制好或者电压不稳，充分融琼脂糖，看到的溶液是清澈如水一般是最好的。再跑的时候看看电压是不是稳定。我们同时跑两个电泳装置的时候就出现过这种问题。
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3楼2013-04-17 22:03:55
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
1949stone: 金币+1, 鼓励 2013-04-19 07:41:19
应该是凝胶配的不好，可能是凝胶聚合不均匀、有气泡、电渗流、胶底部有空隙等原因，导致电泳时电压与电流在凝胶中不均匀，换块凝胶试试看吧。再有就是缓冲溶液有些问题，导致电泳时电压与电流在凝胶中不均匀。
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4楼2013-04-17 22:14:20
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