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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 微米和纳米 » 学术交流 » 奥林巴斯荧光倒置显微镜下观察二氧化硅包裹的荧光染料标记沙门细菌
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呐谁在作祟

金虫 (小有名气)

[求助] 奥林巴斯荧光倒置显微镜下观察二氧化硅包裹的荧光染料标记沙门细菌

向各位专业人士请教，为什么我在奥林巴斯荧光倒置显微镜下观察我用二氧化硅包裹的荧光染料标记的沙门细菌如下？这样是标记上了吗？谢谢~~

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硅 二氧化硅 细菌染色

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环境监测（水务环保）--GC、HPLC、ICP等分析仪器
1楼 2013-04-16 10:03:56
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chenzixuan

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
呐谁在作祟: 金币+1, ★有帮助 2013-04-16 17:00:47
124685887: 金币+1, 欢迎应助，常来交流 2013-04-16 19:01:47
你的二氧化硅有多大 给出的图比例尺是多少 荧光染料波长多少 什么都没有这么看啊
另外 好像焦距没对准
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himistu
2楼2013-04-16 10:38:51
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呐谁在作祟

金虫 (小有名气)
可能是聚焦没对准，今天又试了下，荧光圈变成了一个一个的小点，换算成实际大小大约在5微米左右，这算是标记上细菌了么？还有没有其他方式来证实一下。
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环境监测（水务环保）--GC、HPLC、ICP等分析仪器
3楼2013-04-16 17:00:08
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流玥

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
124685887: 金币+1, 欢迎应助，常来交流 2013-04-16 19:01:53
5微米左右大小好像不太不太是……好像稍微大了些……
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4楼2013-04-16 18:58:05
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呐谁在作祟

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 流玥 at 2013-04-16 18:58:05
5微米左右大小好像不太不太是……好像稍微大了些……

那如何区分纯的荧光试剂和我标记了细菌的荧光试剂呀？我也担心是不是我的荧光试剂自己交联上咯
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环境监测（水务环保）--GC、HPLC、ICP等分析仪器
5楼2013-04-17 16:12:33
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流玥

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你是用拨片玻片染色还是在培养基里染色？
玻片的话可以固定后用流动的水冲一下，培养基的话可以试着离心纯化一下。
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6楼2013-04-17 19:57:29
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呐谁在作祟

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 流玥 at 2013-04-17 19:57:29
你是用拨片玻片染色还是在培养基里染色？
玻片的话可以固定后用流动的水冲一下，培养基的话可以试着离心纯化一下。

培养基里边弄的，离心了好几次，但还是担心带氨基的荧光试剂在戊二醛作用下本身交联上咯，感觉后面的实验设计还是存在问题
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环境监测（水务环保）--GC、HPLC、ICP等分析仪器
7楼2013-04-17 22:48:40
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joyjang

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 呐谁在作祟 at 2013-04-17 22:48:40
培养基里边弄的，离心了好几次，但还是担心带氨基的荧光试剂在戊二醛作用下本身交联上咯，感觉后面的实验设计还是存在问题...

请问你怎么标记沙门菌的
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8楼2014-09-16 20:25:31
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呐谁在作祟

金虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by joyjang at 2014-09-16 20:25:31
请问你怎么标记沙门菌的...

就是戊二醛交联离心然后微孔滤膜过滤呀
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环境监测（水务环保）--GC、HPLC、ICP等分析仪器
9楼2014-09-19 10:25:31
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