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威莱士

金虫 (小有名气)

[求助] PCR技术

请问PCR实验中,引物outer-forward,outer-reverse,inner-forward,inner-reverse都什么意思?为什么需要这么多引物链,我学化学的不懂,请教请教。
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zhenwuhuang

至尊木虫 (文学泰斗)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
威莱士: 金币+5, ★★★很有帮助, 谢谢! 2013-04-15 19:43:02
这是内套式PCR,3————————————————————————-------5
                  OUT —
                            inner——
                                                 ——inner
                                                                                        ——out
                        5__________________________________________3
2楼2013-04-15 19:08:57
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威莱士

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zhenwuhuang at 2013-04-15 19:08:57
这是内套式PCR,3————————————————————————-------5
                  OUT —
                            inner——
                                                 ——inner
...

多谢,但我还想问一下,为什么不直接用两个inner的引物呢?这样不更直接得到目标链吗?
3楼2013-04-15 19:44:28
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yayabanyan

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
威莱士: 金币+5, ★★★★★最佳答案, 多谢! 2013-04-16 11:23:47
这应该是巢式PCR吧,使用两对引物,为了增强特异性。
4楼2013-04-16 00:24:55
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niushuaiji

金虫 (正式写手)

不放弃的小鸟

无疑,巢式PCR,一对外引物,一对内引物,先外后内,为增强扩增的特异性
Tobeornottobe,that'saproblem
5楼2013-04-17 08:35:23
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渭水凡夫

铁虫 (小有名气)

应该是巢式PCR .一般用于模板量超低的片段,进过二次放大 可以加强电泳检出率
平静的水和不叫的狗是最可怕的
6楼2013-04-17 12:36:25
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