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呆也是种态度

银虫 (初入文坛)

[求助] 求助 关于消光系数

使用分光光度计测定DCIP吸光度的变化来测定酶活的时候,是一定要自己测定一条吸光度曲线呢,还是直接使用文献上的消光系数就行了?我看文献上基本都是直接使用在此PH条件下的摩尔消光系数。谢谢了
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懒蛋

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
gyesang: 金币+3, 鼓励回帖应助! 2013-05-29 19:17:57
呆也是种态度: 金币+15 2013-07-30 10:54:06
其实可以用文献上的。毕竟消光系数被定义为,在特定温度、溶液波长下,某种物质溶液的的光吸收特性,这是一种intrinsic characteristic。
但是,你自己测测,肯定得出不一样的值。相差还不小。据我自己的结果来看,这个东西不仅跟上述因素有关,还跟溶液的体积,所用buffer(如果你的体系需要buffer)浓度,仪器等多种因素有关。这只是我测定的结果。不信你试试。

还有,有几个文献所有的DCIP 的extinction coefficient 都不一样,而且是在想通pH,相同波段下。一个是21,一个是16。所以还是自己建一个标线吧,正如百度百科所建议。
向钱看,向厚赚
2楼2013-05-29 04:50:02
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呆也是种态度

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 懒蛋 at 2013-05-29 04:50:02
其实可以用文献上的。毕竟消光系数被定义为,在特定温度、溶液波长下,某种物质溶液的的光吸收特性,这是一种intrinsic characteristic。
但是,你自己测测,肯定得出不一样的值。相差还不小。据我自己的结果来看, ...

哇,这么久终于有人回复了,我自己是做了一个,相差很大呢,其实这个只是一个系数,我认为反正所有的算都是用这个,只要能比较此类酶活的大小,这个数字无所谓了,只要用同一个就行。谢谢你了!!
3楼2013-05-29 23:28:59
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Minda_yuan

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

最近也在纠结此类问题,看到以上回复,受益匪浅!
4楼2013-07-03 10:13:54
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1874非走不可

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by Minda_yuan at 2013-07-03 10:13:54
最近也在纠结此类问题,看到以上回复,受益匪浅!

不知是否可以告知酶活的计算公式?目前实验正为此所困扰呀
5楼2016-07-18 17:37:13
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