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汕头大学海洋科学接受调剂
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goodzdk

铜虫 (小有名气)


[交流] 大神看过来,关于紫外分光光度计使用的若干问题,求赐教,求交流

实验室使用的是双光路的机器,做标准曲线时,用空白试剂做参比液。
     先在两个光路中都用空白试剂,先校零,然后在测试光路中放入一定浓度的溶液,测吸光度,得到了线性较好的标准曲线。
     第二天,先在两个比色皿中盛适量蒸馏水,放入两个光路校零,然后开始在测试光路中检测未知浓度的溶液的吸光度。

问题:第二天,用蒸馏水校零后,参比液位置的蒸馏水未取出,相当于检测时,选用了蒸馏水做参比液,与坐标准曲线时的参比液不一样,这样的操作是否正确呢?
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一首琴歌

木虫 (小有名气)


★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
crity328: 金币+1, 感谢交流,欢迎常来~ 2013-04-16 09:34:45
很简单啊,你用蒸馏水做参照,测一个加显色剂的蒸馏水。如果有吸收就说明有影响,没吸收就没影响

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
5楼2013-04-14 23:07:54
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普通回帖

goodzdk

铜虫 (小有名气)


顶一下,别沉了!
2楼2013-04-14 19:10:56
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Ocean999

捐助贵宾 (小有名气)


★ ★
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crity328: 金币+1, 感谢交流,欢迎常来~ 2013-04-16 09:34:07
被测溶液的溶剂是蒸馏水?如果是蒸馏水的话,我觉得没有问题。原则就是被测溶液中溶剂是什么,就拿此溶剂作为参考样品做基线。
3楼2013-04-14 21:07:33
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goodzdk

铜虫 (小有名气)


引用回帖:
3楼: Originally posted by Ocean999 at 2013-04-14 21:07:33
被测溶液的溶剂是蒸馏水?如果是蒸馏水的话,我觉得没有问题。原则就是被测溶液中溶剂是什么,就拿此溶剂作为参考样品做基线。

溶液的溶剂是蒸馏水。但空白试剂中加有显色剂的,还是不一样。
       是不是标准曲线做好后,再次调用该标曲时,自动以做标曲时的基线为准?与此时的参比液无关?
4楼2013-04-14 21:30:16
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Ocean999

捐助贵宾 (小有名气)


引用回帖:
5楼: Originally posted by 一首琴歌 at 2013-04-14 23:07:54
很简单啊,你用蒸馏水做参照,测一个加显色剂的蒸馏水。如果有吸收就说明有影响,没吸收就没影响

此楼正解
6楼2013-04-15 08:29:36
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goodzdk

铜虫 (小有名气)


引用回帖:
5楼: Originally posted by 一首琴歌 at 2013-04-14 23:07:54
很简单啊,你用蒸馏水做参照,测一个加显色剂的蒸馏水。如果有吸收就说明有影响,没吸收就没影响

嗯,现在弄明白这个问题了。调用标曲并不是以默认以做标曲时的基线为基准。标准做法应是,测试未知浓度溶液吸光度前还用空白试剂校零(同时满足两个校零)。
       你说的也对,如果没有吸收的话,下次可直接用蒸馏水做校零。谢谢!
7楼2013-04-15 19:05:53
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胡琪

铁杆木虫 (著名写手)



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你用蒸馏水做参照,测一个加显色剂的蒸馏水。如果有吸收就说明有影响,没有吸收就没有影响
8楼2013-04-16 10:03:18
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mlanqiang

木虫之王 (文学泰斗)


blessing
9楼2013-04-16 10:35:49
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kaizi0305

木虫 (著名写手)



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不知第一天做的溶剂是什么?如果是蒸馏水还好,是别的溶剂可能还是有一定影响的
有些样品在不同溶剂中,呈现的吸收系数也不一样!
10楼2013-04-16 13:09:27
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谁爱小白菜

木虫 (著名写手)



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肯定不一样啦,要跟标区的参比液是一样的
11楼2013-04-16 13:49:40
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cucucmlar

银虫 (小有名气)



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我们参比液好像一直都是用蒸馏水啊,然后校零一般就用空白液和参比液校零,这样操作正确吗?
12楼2013-04-16 13:58:13
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hoho2010

金虫 (正式写手)



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实验室使用的是双光路的机器,做标准曲线时,用空白试剂做参比液。
先在两个光路中都用空白试剂,先校零,然后在测试光路中放入一定浓度的溶液,测吸光度,得到了线性较好的标准曲线。
-------------------------------------
双光束紫外可见分光光度计,仪器使用时,将空白溶剂放入参比和测试光路中,基线校正。然后在测试光路中放入一定浓度的溶液,测吸光度。
第二天,先在两个比色皿中盛适量蒸馏水,放入两个光路校零,然后开始在测试光路中检测未知浓度的溶液的吸光度。
-----------------未知溶液的空白溶剂应该为蒸馏水。

问题:第二天,用蒸馏水校零后,参比液位置的蒸馏水未取出,相当于检测时,选用了蒸馏水做参比液,与坐标准曲线时的参比液不一样,这样的操作是否正确呢?
----------------若是第一天用的同一未知样,空白溶液为蒸馏水没问题。
13楼2013-04-16 14:21:59
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