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yiloutingyu铜虫 (小有名气)
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二、实验原理 1、Molish反应——α-萘酚反应 实验原理:糖在浓硫酸或浓盐酸的作用下脱水形成糠醛及其衍生物与α-萘酚作用形成紫红色复合物,在糖液和浓硫酸的液面间形成紫环,因此又称紫环反应。自由存在和结合存在的糖均呈阳性反应。此外,各种糠醛衍生物、葡萄糖醛酸以及丙酮、甲酸和乳酸均呈颜色近似的阳性反应。因此,阴性反应证明没有糖类物质的存在;而阳性反应,则说明有糖存在的可能性,需要进一步通过其他糖的定性试验才能确定有糖的存在。 2、蒽酮反应 实验原理:糖经浓酸作用后生成的糠醛及其衍生物与蒽酮(10-酮-9,10-二氢蒽)作用生成蓝绿色复合物。 3、酮糖的Seliwanoff反应 实验原理:该反应是鉴定酮糖的特殊反应。酮糖在酸的作用下较醛糖更易生成羟甲基糠醛。后者与间苯二酚作用生成鲜红色复合物,反应仅需20-30秒。醛糖在浓度较高时或长时间煮沸,才产生微弱的阳性反应。 4、Fehling试验 实验原理:费林试剂是含有硫酸铜和酒石酸钾钠的氢氧化钠溶液。硫酸铜与碱溶液混合加热,则生成黑色的氧化铜沉淀。若同时有还原糖存在,则产生黄色或砖红色的氧化亚铜沉淀。为防止铜离子和碱反应生成氢氧化铜或碱性碳酸铜沉淀,Fehlin试剂中加入酒石酸钾钠,它与Cu2+形成的酒石酸钾钠络合铜离子是可溶性的络离子,该反应是可逆的。平衡后溶液内保持一定浓度的氢氧化铜。费林试剂是一种弱的氧化剂,它不于酮和芳香醛发生反应。 5、Barfoed试验 实验原理:在酸性溶液中,单糖和还原二糖的还原速度有明显差异。Barfoed试剂为弱酸性。单糖在Barfoed试剂的作用下能将Cu2+还原成砖红色的氧化亚铜,时间约为3分钟,而还原二糖则需20分钟左右。所以,该反应可用于区别单糖和还原二糖。当加热时间过长,非还原性二糖经水解后也能呈现阳性反应。 三、实验材料 1.Molish试剂:取5g α-萘酚用95%乙醇溶解至100mL,临用前配制,棕色瓶保存。1%葡萄糖溶液;1%蔗糖溶液;1%淀粉溶液。 2.蒽酮试剂:取0.2g 蒽酮溶于100mL 浓硫酸中,当日配制。待测糖溶液,同Molish试验。 3.Sediwanoff试剂:0.5g 间苯二酚溶于1升盐酸(H2O∶HCl=2∶1)(V/V)中,临用前配制。1%葡萄糖;1%蔗糖;1%果糖。 4.试剂甲:称取34.5g硫酸铜溶于500mL蒸馏水中。 试剂乙:称取125g NaOH 137g酒石酸钾钠溶于500mL蒸馏水中,贮存于具橡皮塞玻璃瓶中。临用前,将试剂甲和试剂乙等量混合。1%葡萄糖溶液;1%蔗糖溶液;1%淀粉溶液。 5.Barfoed试剂:16.7g 乙酸铜溶于近200mL水中,加1.5mL冰醋酸,定容至250mL即可。1%葡萄糖溶液;1%蔗糖溶液;1%淀粉溶液。 |

2楼2013-04-09 19:16:52
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