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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 求助:梯度洗脱时,基线极度漂移,且有倒峰出现
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ningxue

金虫 (小有名气)

[交流] 求助:梯度洗脱时,基线极度漂移,且有倒峰出现

各位高手,我做一中药提取物的梯度洗脱的时候,出现了很奇怪的现象
  Time  Flow  %A  %B  Curve
1  0.01  1.00  56.0  44.0  6
2  30.00  1.00  56.0  44.0  6
3  40.00  1.00  48.0  52.0  6
4  65.00  1.00  48.0  52.0  6


A 为0.2％三乙胺
B为甲醇
用的是BREEZE的工作站
图如下：
谢谢回复了，请各位大哥大姐帮忙
感激不尽


[ Last edited by ningxue on 2007-9-13 at 16:33 ]
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1楼 2007-09-13 16:31:59
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ningxue

金虫 (小有名气)
http://img.dxy.cn/upload/2007/09/13/31136163.gif
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2楼2007-09-13 16:32:42
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gaoshang

铜虫 (小有名气)
★
可乐=枫(金币+1,VIP+0):谢谢应助。欢迎常来药学版。
图未看到。给一下建议。
梯度洗脱基线一般都漂，且有些多余的峰。如果不是法定标准或者标准允许调流动相，你可试着调一下三乙胺的浓度，或者加些缓冲盐试一下。
当然，你应该先试一下流动相的组分是否有UV吸收。
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3楼2007-09-13 17:53:20
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zuishui001

金虫 (正式写手)
调节一下缓冲液,应该可以作好
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4楼2007-09-13 23:34:28
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diannao001

铁杆木虫 (小有名气)
★
karl2100(金币+1,VIP+0):多谢指教！
梯度洗脱的缺点就是容易产生基线漂移，建议如果使用梯度洗脱时间一定要长，拟设定的时间是否有点短了，我以前也出现过这样的情况，以后就没有用梯度了，现在及使用也是长时间的冲洗以后再换另一种流动相冲洗。
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5楼2007-09-14 08:43:27
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ylh314

铁虫 (初入文坛)
梯度洗脱用流动相如果有甲醇则很溶液引起基线漂移，你可以试试其他的流动相组成。应该没有问题的
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6楼2007-09-14 10:59:47
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ningxue

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by diannao001 at 2007-9-14 08:43 AM:
...拟设定的时间是否有点短了，我以前也出现过这样的情况，以后就没有用梯度了，现在及使用也是长时间的冲洗以后再换另一种流动相冲洗。

这是我截取的一段时间,我一共用了70min,只是为什么换梯度的时候,基线会漂移那么高,自己也想了:可能是因为这个漂移的基线里包含一些物质出的峰,可是为什么会有倒峰出现呢.
我用起始浓度走样,在差不多这个位置也出现倒峰,而用相同浓度的等度洗脱则不出现,是正峰.
这是什么原因呢?
还请高手们不吝赐教
谢谢
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7楼2007-09-17 10:02:19
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ningxue

金虫 (小有名气)
难道是混合不均,可是我用的是WATERS自带的在线脱气机啊
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8楼2007-09-17 10:04:03
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long224

银虫 (小有名气)
★
karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢发言！
呵呵 很可能是 是 气泡的原因啊
在线脱气 就 能保证一定脱干净了 吗
未必吧
我们刚上的 岛津   做梯度 洗脱 根本就不行
漂移的 没法说
虽然是 四泵的  现在还是陪好流动相
用 自动进样
还是别太相信仪器了
最好 不要
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9楼2007-09-17 14:00:16
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shinlyn

铁虫 (初入文坛)
你用什么溶剂？是否用水溶解的？用水溶解的话经常有倒峰。
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10楼2007-09-17 21:20:54
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