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九公主

银虫 (小有名气)

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[求助] 免疫组化图片评分

请问大家怎样用十三点评分法对免疫组化图片进行评分？只用一个IPP就好了吗，大家有没有详细的步骤？

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1楼 2013-04-09 09:27:51

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侯伯杨

金虫 (著名写手)

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【答案】应助回帖

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九公主(缩++影代发): 金币+5, 谢谢应助 2013-04-09 13:01:01

这个⑴、石蜡切片脱蜡至水。
⑵、 3%H 2 O 2 室温孵育 5-10 分钟，以消除内源性过氧化物酶的活性。
⑶、蒸馏水冲洗， PBS 浸泡 5 分钟 x2 （如需抗原修复，可在此步后进行）。
⑷、 5-10% 正常山羊血清（PBS 稀释）封闭，室温孵育 10 分钟，倾去血清，勿洗。滴加一抗工作液， 37 ℃ 孵育 1-2 小时或 4 ℃ 过夜。
⑸、 PBS 冲洗， 5 分钟 x3 次。
⑹、滴加适量生物素标记二抗工作液， 37 ℃ 孵育 10-30 分钟。
⑺、 PBS 冲洗， 5 分钟 x3 次。
⑻、滴加适量的辣根酶或碱性磷酸酶标记的链霉卵白素工作液， 37 ℃ 孵育 10-30 分钟。
⑼、 PBS 冲洗， 5 分钟 x3 次。
⑽、显色剂显色 3-15 分钟（DAB 或 NBT/BCIP）
⑾、自来水充分冲洗，复染，脱水，透明，封片。
对不起，知识有限，就知道这些了