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求教细胞色素P450问题
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| 最近有个实验想提取真菌菌丝内细胞色素P450，真菌摇瓶培养已经产生很多细小的菌丝球了，想请问下前辈们什么时候停止培养提取细胞色素P450最合适（细胞色素P450的产生与生长状况有联系吗），还想请教下细胞色素P450在PBS缓冲液中能保持活性多久？ |
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【答案】应助回帖
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真菌P450应该都是膜结合状态，破碎后超速离心提取微粒体，用CO差示光谱检测即可确定；初次提取，应该去生长旺盛期的菌体相对合适吧，然后每个一段时间动态取样检测。 P450膜结合状态的活性不是很稳定，反正切记一直在冰上操作；原核表达的P450需要在缓冲液中加入很多稳定物质，如甘油、PMSF、抑肽酶等，-70度保存，分装后使用。 |
2楼2013-04-07 11:52:31
3楼2013-05-29 09:35:03