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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » HPLC 可溶性单糖
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mandywang

铁虫 (正式写手)

[求助] HPLC 可溶性单糖

所用仪器Agilent 1260 糖柱 流动相 乙腈和水 RID 检测器
现在出的峰总是严重拖尾 而且分离效果不好，附件中
可是小虫又不想做衍生处理，样品是根系分泌物，
请教 条件怎么修改才能获得较理想的样品峰。标样分离效果还可以
一共测了7种单糖
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    • 2013-04-04 10:04:34, 21.91 K

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inging
1楼 2013-04-04 10:08:00
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

yuting_li

铁杆木虫 (著名写手)

色谱维修工程师

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
mandywang: 金币+10, ★有帮助 2013-04-07 21:46:22
1.使用RID检测器首先明确一点，只能使用一个通道，所以我看你说的流动相是乙腈和水，这应该事先预混合好抽滤后放在一个通道内使用。（因为RID是一通用型检测器，它对流动相整体都有响应）。这样可以降低噪音。
2.我看有的峰是平头峰，应该是超出线性范围了。应该降低进样量。这样可以有好的分离，减少拖尾。
3.RID 检测池的温度设定在35度以上，同样的柱温箱的温度要设定在35度 或40度。这样也可以降低噪音。
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有因有果
2楼2013-04-05 12:54:26
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swt1898

铁虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
mandywang: 金币+5, ★有帮助, 谢谢 2013-04-07 21:50:20
你的仪器硬件很好了，关键是色谱柱，安捷伦的糖柱确实有些捉襟见肘了，要用专用的糖柱，离子交换柱

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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4楼2013-04-06 10:49:42
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fujinguo06

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

看过数据，首先流动相乙腈和水应该没问题，两者比例可以尝试调整看看效果，检测器如果有蒸发光散射检测器就更好，因为示差折光易受环境温度影响，另外，色谱柱，以前本人试过氨基柱也可以分开5种单糖，有稍微的拖尾现象，你可以考虑其它的糖柱，这方面得自己查不同色谱柱供应商的资料。最后，在流动相里面添加一些其它组分（如三乙胺），有可能有助于减少拖尾，这个我没有把握。希望能帮助你。参考文献：二醇基柱高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定饮料中的糖。
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6楼2013-04-08 08:43:49
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jgy2000

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

柱温你用的多少呀？一般用糖柱分离糖柱温要80℃峰形才会好
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7楼2013-04-08 09:31:45
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普通回帖

留级生

木虫 (著名写手)
是不是用蒸发光散射检测器可能更好些。
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取次花丛懒回顾，半缘修道半缘君。
3楼2013-04-05 14:47:21
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mandywang

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yuting_li at 2013-04-05 12:54:26
1.使用RID检测器首先明确一点，只能使用一个通道，所以我看你说的流动相是乙腈和水，这应该事先预混合好抽滤后放在一个通道内使用。（因为RID是一通用型检测器，它对流动相整体都有响应）。这样可以降低噪音。
2.我 ...

谢谢，我再试试
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inging
5楼2013-04-07 21:46:04
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爱lingling

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

楼主稀释一下再看看
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8楼2013-04-08 13:11:03
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wuzhirong

铜虫 (正式写手)
我想请问一下楼主你的问题解决了吗?我也准备测可溶性糖，可否交流一下
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9楼2013-05-21 14:18:24
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zhuzhuok1993

新虫 (初入文坛)
请问你具体是怎么测的呀？我现在也想用HPLC测定糖的种类
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10楼2017-09-06 10:53:39
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