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枫叶丹

新虫 (正式写手)


[交流] DGGE相关

I recommend staining while shaking for 30 minutes and then transferring to a de-staining tank (water is fine) for another 15-30 minutes.
这一步具体操作?(这是染色的时候,前半句是什么意思,我一直都是直接转移到染色槽中染色)
刚开始电泳时是否应该打开泵,电泳期间是否严禁电流断一下?
切胶回收后需要在离心管中加玻璃珠吗?
跑胶时是否要两块胶
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mirror3895

铁杆木虫 (正式写手)


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枫叶丹: 金币+1, 为什么还要漂洗呢, 我以前都是直接染色30min然后照胶 2013-04-04 15:19:59
枫叶丹(gyesang代发): 金币+1, 鼓励应助! 2013-04-04 21:20:50
枫叶丹: 金币+4 2013-04-06 09:47:25
说的是染色30min后转入装有清水的盒子中,漂洗15-30min这个意思吧。
开始电泳是打开泵,需要泵将电泳液泵到有电极的槽里,这样才能形成电流通路。电泳期间偶尔断电没有关系,就像琼脂糖凝胶电泳一样,中间停短暂一会是没有影响的。
切胶回收后,文献里面说需要将凝胶捣碎,不过我们一般是直接加无菌水浸没胶块,冰箱4度放置一夜,基本就可以用这个作为模板去扩增了。
跑胶时可以只做一块胶但另一面的玻璃板要加上,不然上面装不住电泳液,不能形成通路。
2楼2013-04-04 09:49:51
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mirror3895

铁杆木虫 (正式写手)


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枫叶丹: 金币+1, 谢谢 2013-04-06 09:47:09
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流! 2013-05-31 23:03:30
我们这边也是没有漂洗这一步,只不过染完色之后是用水过一下,就直接拍照了。可能漂洗是避免杂色背景干扰吧
3楼2013-04-04 20:52:13
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