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枫叶丹

新虫 (正式写手)

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[交流] DGGE相关

I recommend staining while shaking for 30 minutes and then transferring to a de-staining tank (water is fine) for another 15-30 minutes.
这一步具体操作？（这是染色的时候，前半句是什么意思，我一直都是直接转移到染色槽中染色）
刚开始电泳时是否应该打开泵，电泳期间是否严禁电流断一下？
切胶回收后需要在离心管中加玻璃珠吗？
跑胶时是否要两块胶

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1楼 2013-04-03 21:08:13

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mirror3895

铁杆木虫 (正式写手)

应助: 24 (小学生)
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★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
枫叶丹: 金币+1, 为什么还要漂洗呢，我以前都是直接染色30min然后照胶 2013-04-04 15:19:59
枫叶丹(gyesang代发): 金币+1, 鼓励应助！ 2013-04-04 21:20:50
枫叶丹: 金币+4 2013-04-06 09:47:25

说的是染色30min后转入装有清水的盒子中，漂洗15-30min这个意思吧。
开始电泳是打开泵，需要泵将电泳液泵到有电极的槽里，这样才能形成电流通路。电泳期间偶尔断电没有关系，就像琼脂糖凝胶电泳一样，中间停短暂一会是没有影响的。
切胶回收后，文献里面说需要将凝胶捣碎，不过我们一般是直接加无菌水浸没胶块，冰箱4度放置一夜，基本就可以用这个作为模板去扩增了。
跑胶时可以只做一块胶但另一面的玻璃板要加上，不然上面装不住电泳液，不能形成通路。