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无争1209银虫 (小有名气)
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[交流]
有谁做过组织的流式
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我想检测海马的神经元凋亡情况，可是按照以下步骤： 无菌条件下分离缺血侧海马组织100mg，冰冷的D-Hank′s液冲洗后剪碎组织块，加入1.25g•L-1的胰蛋白酶（1ml胰酶/100mg组织），37℃消化30min，以含10%小牛血清的DMEM培养基终止消化。反复吹打后，300目筛网过滤，滤液以1000rpm离心5min，弃上清，D-Hank′s液冲洗2次，再次离心5min，沉淀用含10%小牛血清的DMEM培养基悬浮，计数后制成浓度为2×106个•ml -1的细胞悬液。 但是在10倍显微镜低下观察却没有看到细胞，只是看到一些碎碎的东西，没有看到圆圆的细胞，不知问题出在哪儿？请各位老师指教。 |
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