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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 提取DNA
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today521328

新虫 (初入文坛)

[交流] 提取DNA

各位
      用DNA试剂盒提取DNA过程中第一步首先是震荡，我想问一下，震荡强度是多大，需要震荡多长时间，加入震荡强度太大或者时间太长是不是就把DNA震碎了呢！
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1楼 2013-04-01 20:24:41
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chenchan7

金虫 (小有名气)
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today521328(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2013-05-31 23:04:32
这要看你提取DNA的目的。。。如果所制备的DNA要用来构建克隆文库就不能震荡。。。
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5楼2013-04-01 22:33:04
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
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myprayer: 金币+3, 应助指数+1, 鼓励应助，分子生物版块，期待你的精彩。 2013-04-02 09:09:05
大分子想要保持完整性，操作时应尽量温柔，避免剧烈的机械力作用。根据提DNA的目的，有些实验不要求特别严格。即使再小心，提出来的DNA也会shear成几十kb大小左右。
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6楼2013-04-01 23:55:11
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concon123456

铜虫 (小有名气)
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myprayer: 金币+3, 鼓励应助，分子生物版块，期待你的精彩。 2013-04-02 09:09:23
你第一步不要把细胞裂解，使DNA释放出来？
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7楼2013-04-02 09:06:48
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gaoyang636

木虫 (著名写手)
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请问你用的啥试剂盒？
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8楼2013-04-02 09:26:18
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意孤城_

金虫 (正式写手)
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today521328(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-31 23:04:42
一般的试剂盒是不会的  提取第一步加的容易也不会破解细胞的 这个时候DNA没有释放出来
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9楼2013-04-02 09:49:13
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jk_xdx

银虫 (小有名气)
什么试剂盒呢？
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10楼2013-04-02 10:05:02
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爱上文慧

银虫 (小有名气)
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today521328(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2013-05-31 23:04:49
第一步都是让菌体悬浮吧？随便震，没问题的。当加入裂解液等试剂之后要求是上下颠倒混匀，这时候才是裂解细胞，这时需要轻柔
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11楼2013-04-02 10:34:19
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sweep天下

新虫 (初入文坛)
★
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问题不是很具体~~~震荡还是温柔点
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12楼2013-04-02 11:05:41
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木--林--森

铜虫 (小有名气)
不用的
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13楼2013-04-02 23:29:19
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王者归来001

木虫 (小有名气)
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gyesang: 金币+1, 鼓励交流！ 2013-04-05 13:30:30
一般试剂盒说的震荡之势一般的，用涡旋仪涡旋1-2分钟就好了，是为了充分混合，便于提取试剂起作用
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14楼2013-04-03 23:13:22
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Iloveshuai

银虫 (初入文坛)
★ ★
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gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-31 23:05:01
一般来说刚提的时候不会剧烈震荡的，但是提水中的DNA时有涡旋的过程呀
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15楼2013-04-04 17:44:07
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yingying15882楼
2013-04-01 21:41   回复  
myprayer: 金币-1, 请小虫子遵循版规，请勿单纯回复表情在应助帖子中。 2013-04-02 09:10:15
miaojiabing3楼
2013-04-01 22:06   回复  
天涯20124楼
2013-04-01 22:09   回复  
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