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phoenix0

铁杆木虫 (正式写手)

[求助] 裂解或者酶解花粉

最近做单个花粉PCR,但是好像不好把花粉完全裂解或者酶解,把内容物完全释放出来,再去做PCR……
请教大家有没有做过这方面的实验,有没有经验?
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xyzhk_2008

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我做的是小孢子 就是花粉前期 不过我得到小孢子之后用RNA试剂盒裂解液RL
提取RNA 反转录扩pcr
乖乖女
2楼2013-04-02 15:18:54
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wolfghost

版主 (知名作家)

优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

楼主可以看看这篇专利!
植物单花粉高通量收集与PCR检测方法,专利申请号:CN200710008694.3
网络问题无法上传文件,楼主自己下载这篇专利吧
大刀向鬼子的头上砍去!ChopJapstoDeath!
3楼2013-04-02 15:25:04
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phoenix0

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by wolfghost at 2013-04-02 15:25:04
楼主可以看看这篇专利!
植物单花粉高通量收集与PCR检测方法,专利申请号:CN200710008694.3
网络问题无法上传文件,楼主自己下载这篇专利吧

谢谢,这个专利我看到了,也按照其方法做了尝试;电泳的结果显示,这个方法裂解的效果还比不上纯水裂解效果;而且PCR完成后的镜检结果是花粉壁依旧完整的……
4楼2013-04-02 15:52:09
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phoenix0

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by xyzhk_2008 at 2013-04-02 15:18:54
我做的是小孢子 就是花粉前期 不过我得到小孢子之后用RNA试剂盒裂解液RL
提取RNA 反转录扩pcr

小孢子时期,花粉壁很脆弱,但是花粉成熟后,花粉壁就非常的难以酶解了……
5楼2013-04-02 15:54:37
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wolfghost

版主 (知名作家)

优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
phoenix0: 金币+4, 博学EPI+1, 有帮助 2013-04-02 16:40:35
楼主试试:冷冻气流高压冲击破碎
花粉壁在冷冻时,易受外力冲击破碎
大刀向鬼子的头上砍去!ChopJapstoDeath!
6楼2013-04-02 16:13:58
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phoenix0

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by wolfghost at 2013-04-02 16:13:58
楼主试试:冷冻气流高压冲击破碎
花粉壁在冷冻时,易受外力冲击破碎

这个有具体方法么?
7楼2013-04-02 16:40:21
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