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ycy66ds

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by silentwind87 at 2013-04-02 09:45:56
EDC/NHS是用来活化羧基的,形成中间体酯然后与氨基反应形成酰胺,需要注意的就是活化阶段和酰胺化阶段的体系pH,我记得貌似活化阶段是pH5.5反应活性最高,然后调至中性进行酰胺化。具体你可以搜一下NHS和EDC的产品说 ...

原来还分两个阶段,非常感谢!
11楼2013-04-15 08:49:03
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ycy66ds

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by silentwind87 at 2013-04-02 09:45:56
EDC/NHS是用来活化羧基的,形成中间体酯然后与氨基反应形成酰胺,需要注意的就是活化阶段和酰胺化阶段的体系pH,我记得貌似活化阶段是pH5.5反应活性最高,然后调至中性进行酰胺化。具体你可以搜一下NHS和EDC的产品说 ...

请问蛋白连上PEG后一般用什么方法检测呢?能用SDS-PAGE检测吗?
12楼2013-06-03 17:31:24
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yaiqi-87

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
12楼: Originally posted by ycy66ds at 2013-06-03 17:31:24
请问蛋白连上PEG后一般用什么方法检测呢?能用SDS-PAGE检测吗?...

如果PEG的分子量较大的话,电泳是能够看出来的
我用EDC/NHS方法来偶联蛋白和PEG-COOH,蛋白24K,PEG 5K,电泳后没见在29K有条带,倒是在48K附近有条带出现,应该是蛋白与蛋白之间发生交联了,请问你有遇到这种情况吗?谢谢!
13楼2014-06-10 17:02:32
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