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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 纳米生物材料 » 蛋白上连抗体和PEG
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ycy66ds

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by silentwind87 at 2013-04-02 09:45:56
EDC/NHS是用来活化羧基的，形成中间体酯然后与氨基反应形成酰胺，需要注意的就是活化阶段和酰胺化阶段的体系pH，我记得貌似活化阶段是pH5.5反应活性最高，然后调至中性进行酰胺化。具体你可以搜一下NHS和EDC的产品说 ...

原来还分两个阶段，非常感谢！
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11楼2013-04-15 08:49:03
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ycy66ds

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by silentwind87 at 2013-04-02 09:45:56
EDC/NHS是用来活化羧基的，形成中间体酯然后与氨基反应形成酰胺，需要注意的就是活化阶段和酰胺化阶段的体系pH，我记得貌似活化阶段是pH5.5反应活性最高，然后调至中性进行酰胺化。具体你可以搜一下NHS和EDC的产品说 ...

请问蛋白连上PEG后一般用什么方法检测呢？能用SDS-PAGE检测吗？
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12楼2013-06-03 17:31:24
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yaiqi-87

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by ycy66ds at 2013-06-03 17:31:24
请问蛋白连上PEG后一般用什么方法检测呢？能用SDS-PAGE检测吗？...

如果PEG的分子量较大的话，电泳是能够看出来的
我用EDC/NHS方法来偶联蛋白和PEG-COOH，蛋白24K，PEG 5K,电泳后没见在29K有条带，倒是在48K附近有条带出现，应该是蛋白与蛋白之间发生交联了，请问你有遇到这种情况吗？谢谢！
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13楼2014-06-10 17:02:32
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