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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » Real time PCR 疑难问题？
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jdrkna

铁虫 (小有名气)

[交流] Real time PCR 疑难问题？

我在想一个问题，如果模板中根本没有转录目的基因的mRNA，那么在做Real time的时候，能扩出带来吗？做出的溶解曲线该是什么样的呢？扩增是不是只能到达指数期？有没有哪位达人指点一下啊，多谢！
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1楼 2013-03-31 13:34:34
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zr281069

银虫 (小有名气)
★ ★
jdrkna(金币+1): 谢谢参与
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2013-04-26 21:22:22
不可以吧 因为你设计的引物是根据目的片段设计的 没有目的基因怎么扩  除非你那引物特异性差 出来其他的带了
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3楼2013-03-31 21:42:07
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
jdrkna(金币+1): 谢谢参与
gyesang: 金币+1, 鼓励交流！ 2013-04-26 21:21:02
如果目的基因不转录的话，做RT-PCR时应该无扩增。无扩增产物也就不会有熔解曲线了。
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4楼2013-04-01 00:43:52
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bloodwar

银虫 (小有名气)
★
jdrkna(金币+1): 谢谢参与
没靶标你扩啥啊
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5楼2013-04-01 06:10:56
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宋虫虫

铜虫 (小有名气)
★
jdrkna(金币+1): 谢谢参与
pcr，只要符合基本的反应条件就能满足实验，mRNA？
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6楼2013-04-01 19:15:57
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意孤城_

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
2楼正解  一般可以扩出来 但特别不特意（如果你的退火温度低的话）
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7楼2013-04-02 09:57:57
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
Realtime PCR时无模板对照孔可能会有扩增曲线，但这是假象，一般Ct值在35以后，而且没有溶解曲线。
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8楼2013-04-02 20:03:22
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fyz72322楼
2013-03-31 20:08   回复  
jdrkna(金币+1): 谢谢参与
晓学究9楼
2013-04-02 23:04   回复  
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