应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 综合其他 » β半乳糖酶分解X-gal 后产生的蓝色物质若用分光光度计测其最大吸收峰是多少？
91/1返回列表
查看: 1915  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

huyan0817

木虫 (正式写手)

[求助] β半乳糖酶分解X-gal 后产生的蓝色物质若用分光光度计测其最大吸收峰是多少？

哪位大神知道，麻烦说下！谢谢！！！
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2013-03-27 19:48:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 鼓励发帖交流 2013-03-28 07:37:29
有点好奇楼主怎么要做这个？一般蓝白班筛选，能识别出颜色变化就可以了，没见到具体测的。实在需要测定结果，自己扫个上清液全波长吧
赞一下 回复此楼
植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
2楼2013-03-28 00:46:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huyan0817

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by starseacow at 2013-03-28 00:46:42
有点好奇楼主怎么要做这个？一般蓝白班筛选，能识别出颜色变化就可以了，没见到具体测的。实在需要测定结果，自己扫个上清液全波长吧

我们想用来检测蛋白质的表达量，因为荧光检测太贵，所有想用蓝白斑筛选来替换，节约成本
赞一下 回复此楼
3楼2013-03-28 13:16:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by huyan0817 at 2013-03-28 13:16:01
我们想用来检测蛋白质的表达量，因为荧光检测太贵，所有想用蓝白斑筛选来替换，节约成本...

没见过这样的做法，楼主能否把参考文献分享一下？
赞一下 回复此楼
植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
4楼2013-03-28 17:14:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huyan0817

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by starseacow at 2013-03-28 17:14:23
没见过这样的做法，楼主能否把参考文献分享一下？...

就是一个想法而已，就是在目标蛋白前面加上一个β-半乳糖酶基因，目标蛋白表达多少β-半乳糖酶也相应表达多少，利用其分解底物X-gal显色，根据颜色深浅来间接反映目标蛋白的表达量。所以想知道蓝色沉淀物质的最大吸收峰。
赞一下 回复此楼
5楼2013-03-28 19:30:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

这个想法很有意思，但楼主怎么确定产生的蓝色物质多少与蛋白表达量线性相关呢？在这个测定过程中，菌生长速度，蛋白表达水平，酶催化反应速度都会影响结果，需要考察的因素比较多。
赞一下 回复此楼
植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
6楼2013-03-29 00:07:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huyan0817

木虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by starseacow at 2013-03-29 00:07:03
这个想法很有意思，但楼主怎么确定产生的蓝色物质多少与蛋白表达量线性相关呢？在这个测定过程中，菌生长速度，蛋白表达水平，酶催化反应速度都会影响结果，需要考察的因素比较多。

我知道，所以得控制酶催化反应的时间，底物也要足够，另外我们这个想法主要是为了大概测定下我们构建的载体的蛋白表达量及蛋白纯化效率，不要求太过精确。
赞一下 回复此楼
7楼2013-03-29 10:04:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by huyan0817 at 2013-03-29 10:04:09
我知道，所以得控制酶催化反应的时间，底物也要足够，另外我们这个想法主要是为了大概测定下我们构建的载体的蛋白表达量及蛋白纯化效率，不要求太过精确。...

我估计这个没人搞过，还是建议你做个预实验，设置不同蛋白表达水平组，取上清扫一下全波长，看看哪个波长吸光度与蛋白表达相关
赞一下 回复此楼
植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
8楼2013-03-29 18:54:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huyan0817

木虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by starseacow at 2013-03-29 18:54:23
我估计这个没人搞过，还是建议你做个预实验，设置不同蛋白表达水平组，取上清扫一下全波长，看看哪个波长吸光度与蛋白表达相关...

好的。。。谢谢建议。。
回复此楼
9楼2013-03-29 21:55:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 huyan0817 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭