应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » RNA提取结果，我提了好多次，传说中的高质量没出现
202/2返回列表上一页12
查看: 2491  |  回复: 19
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

goodboy

金虫 (小有名气)
首先DNA污染确实很严重，其次电泳时间过长，建议你做1%琼脂糖胶（新配置的）在新的电泳缓冲液中跑10min就可以看清楚条带
赞一下 回复此楼
11楼2013-03-28 00:17:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

vazyme小谷

新虫 (初入文坛)
本帖内容被屏蔽
12楼2013-03-29 13:29:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xudabin98

木虫 (正式写手)
http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=5191776 希望对你能够有帮助
赞一下 回复此楼
13楼2013-03-29 16:25:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

platanus

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
提取的RNA都有降解，做RACE对RNA的质量要求比较高，你提取的没有一个可以用来做RACE的，重提吧！加油！
赞一下 回复此楼
14楼2013-03-29 17:29:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fengyunqb

新虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 晓学究 at 2013-03-27 22:26:05
你这个就是DNA污染加RNA降解，管子必须用进口的或泡过DEPC的国产的。操作一定在冰上进行，总之一点，要想尽办法减少RNase污染，另外，你跑的电泳时间是不是太久了。

谢谢指点，DEPC浸泡是必须的，我一般是液氮研磨，粉末状很给力，长期提RNA，全段时间中邪了就是污染，后来我用DNA酶处理下OK了，现在好的5RACE结果已经出来了。
赞一下 回复此楼
15楼2013-04-20 15:14:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fengyunqb

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 涌动的泉 at 2013-03-27 11:58:22
重提吧
貌似六个中有3个是有DNA污染的，其他的降解了
用具一定要无RNA酶，如果是手动研磨的话尽量缩短研磨时间，不过你的是鱼脑的话应该不用研太久

谢谢指点，DEPC浸泡是必须的，我一般是液氮研磨，粉末状很给力，长期提RNA，前段时间中邪了就是污染，后来我用DNA酶处理下OK了，现在好的5RACE结果已经出来了。
赞一下 回复此楼
16楼2013-04-20 15:14:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fengyunqb

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by jinqimaggie at 2013-03-27 13:09:00
可以加RNAse INHIBITOR

谢谢指点，DEPC浸泡是必须的，我一般是液氮研磨，粉末状很给力，长期提RNA，前段时间中邪了就是污染，后来我用DNA酶处理下OK了，现在好的5RACE结果已经出来了。
赞一下 回复此楼
17楼2013-04-20 15:14:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fengyunqb

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by shangming at 2013-03-27 13:51:35
哪一个也不行，用DEPC水重新提吧

谢谢指点，DEPC浸泡是必须的，我一般是液氮研磨，粉末状很给力，长期提RNA，前段时间中邪了就是污染，后来我用DNA酶处理下OK了，现在好的5RACE结果已经出来了。
赞一下 回复此楼
18楼2013-04-20 15:14:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fengyunqb

新虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by gaoyang636 at 2013-03-27 15:50:06
dna污染比较严重，请问lz是用的什么提的，我建议换用invitrogen的TRIZol（注意买正品的），用这个的话，其实基本不需要加DNase的。

谢谢指点，DEPC浸泡是必须的，我一般是液氮研磨，粉末状很给力，长期提RNA，前段时间中邪了就是污染，后来我用DNA酶处理下OK了，现在好的5RACE结果已经出来了。
赞一下 回复此楼
19楼2013-04-20 15:15:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fengyunqb

新虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by amilie030312 at 2013-03-27 16:44:47
胰脏、脾脏、大脑等部位RNA酶较多，想得到好的RNA提取结果较难，我一般是取样后马上放入Trizol中，然后尽量加快抽提实验的速度，所有的耗材和试剂做到无RNase，实验结束后分装，留一管做检测，其他马上入-80冰箱。电 ...

谢谢指点，DEPC浸泡是必须的，我一般是液氮研磨，粉末状很给力，长期提RNA，前段时间中邪了就是污染，后来我用DNA酶处理下OK了，现在好的5RACE结果已经出来了。
赞一下 回复此楼
20楼2013-04-20 15:15:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 fengyunqb 的主题更新
202/2返回列表上一页12
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[博后之家] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 4/200 2026-09-14 23:24 by vZfe6xYu34yj
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 3/150 2026-09-14 22:33 by vZfe6xYu34yj
[考研] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 5/250 2026-09-14 22:25 by vZfe6xYu34yj
[找工作] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +5 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 5/250 2026-09-14 22:13 by vZfe6xYu34yj
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 5/250 2026-09-14 22:12 by vZfe6xYu34yj
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 5/250 2026-09-14 22:01 by vZfe6xYu34yj
[考博] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 5/250 2026-09-14 21:36 by vZfe6xYu34yj
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 7/350 2026-09-14 21:21 by vZfe6xYu34yj
[考博] 上海工程技术大学激光智能制造课题组招收博士研究生 +4 两三岁ss 2026-09-14 4/200 2026-09-14 20:29 by 班主任的同桌
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 4/200 2026-09-14 17:49 by Aj1rhIDL5ixY
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 4/200 2026-09-14 16:13 by Aj1rhIDL5ixY
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 6/300 2026-09-14 15:21 by Aj1rhIDL5ixY
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 3/150 2026-09-14 15:09 by Aj1rhIDL5ixY
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 3/150 2026-09-14 14:57 by Aj1rhIDL5ixY
[基金申请] 求教各位大神：2026教育部人文社科青年基金项目何时公示呀？ +5 云宴山人 2026-09-10 7/350 2026-09-14 12:11 by ecnu2013
[找工作] 浙江师范大学是怎么坑我的 +6 recruit123 2026-09-09 6/300 2026-09-14 12:00 by 萨仁其其格
[考博] 西北工业大学材料学院电化学传感与催化课题组招收2027年推免研究生、博士生、博士后 +3 马方园 2026-09-10 4/200 2026-09-14 09:29 by Chem张zz
[考博] 27秋季材料博士申请求助 10+3 Cahal1 2026-09-11 4/200 2026-09-14 08:50 by 北京莱茵编辑
[教师之家] 浙江师范大学是怎么坑我的 +10 recruit123 2026-09-09 15/750 2026-09-13 10:45 by seaskyy
[基金申请] 面上有专家说实验设备不是我们单位的 +6 zj_muchong 2026-09-08 8/400 2026-09-11 06:56 by suifengdao
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭