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stt19890101

铜虫 (初入文坛)

[求助] western blot

各位亲，western blot蛋白分子量在10-100kDa, 分离胶多大的浓度合适呀？我配的胶凝的特别慢，是气温的原因吗？有没有人试着把胶用微波炉打一下的？Sample Text各
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1楼 2013-03-23 16:49:04
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Francis_zw

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

1.如果是10kd，我建议 15%的分离胶，如果再小的话，可以选择用Tricine胶，我最近做的蛋白在60kd，一般我常用的是10%的胶。
2.胶凝固的慢要注意Aps要现配现用，而TEMED最好查看一下生产日期。
3.胶用微波炉打一下，我到没有试过和听说过，如果你具有创新精神的话，呵呵~
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12楼2013-03-25 15:33:41
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无为书生

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
stt19890101: 金币+1, ★有帮助 2013-03-24 09:27:09
12--15%左右就可以，胶凝得慢可稍微多加点过硫酸铵和temed.
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2楼2013-03-23 20:11:38
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高处无雨

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
试试重新配置过硫酸铵吧！
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3楼2013-03-24 16:56:58
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dearzhanglei

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
一般都是10%-15%，夏天凝的慢，冬天凝的快，TEMED起主要作用！
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4楼2013-03-24 21:33:57
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