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why0393金虫 (正式写手)
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牛副流感3型IFA实验
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本人是做单抗的,现有分泌抗BPIV3单抗的杂交瘤细胞,抽取细胞培养上清做IFA鉴定,却发现了不正常的问题。 本人使用杂交瘤细胞培养上清做一抗,购买的羊抗鼠FITC标记单抗做二抗,按照正常的实验路径,接毒两天后固定,洗涤,加一抗,洗涤,加二抗,洗涤,观察结果: 1、第一眼看来,样品的荧光效果特别好,就连细胞脱落的部位都很明显,阴性对照没有出现这样的荧光 2、第二眼看来,不对劲啊,怎么都是细胞边界亮呢,细胞浆很少有荧光出现,莫非,全都是非特异性的?假阳性?也不对啊,稀释的一抗呈阶梯性的亮光减少啊! 3、晕!有阴性有样品没有阳性!呵呵,本实验没找到阳性参考试剂,下一步准备自己制备一些抗性小鼠血清验证。 PS:这可不对啊,以前的IFA实验,别人的IFA实验全是这么来,到底怎么回事??? 求高手指教啊啊啊! 图片发不上去,于是就选择了文件附件形式,多多体谅! |
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- 附件 2 : 阴性对照.jpg
2013-03-22 19:58:39, 684.6 K
2013-03-22 20:02:33, 515.54 K
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