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why0393

金虫 (正式写手)

[求助] 牛副流感3型IFA实验

本人是做单抗的,现有分泌抗BPIV3单抗的杂交瘤细胞,抽取细胞培养上清做IFA鉴定,却发现了不正常的问题。
本人使用杂交瘤细胞培养上清做一抗,购买的羊抗鼠FITC标记单抗做二抗,按照正常的实验路径,接毒两天后固定,洗涤,加一抗,洗涤,加二抗,洗涤,观察结果:
1、第一眼看来,样品的荧光效果特别好,就连细胞脱落的部位都很明显,阴性对照没有出现这样的荧光
2、第二眼看来,不对劲啊,怎么都是细胞边界亮呢,细胞浆很少有荧光出现,莫非,全都是非特异性的?假阳性?也不对啊,稀释的一抗呈阶梯性的亮光减少啊!
3、晕!有阴性有样品没有阳性!呵呵,本实验没找到阳性参考试剂,下一步准备自己制备一些抗性小鼠血清验证。

PS:这可不对啊,以前的IFA实验,别人的IFA实验全是这么来,到底怎么回事???

求高手指教啊啊啊!

图片发不上去,于是就选择了文件附件形式,多多体谅!
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  • 2013-03-22 19:58:39, 684.6 K
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why0393

金虫 (正式写手)

啊!居然没人遇到过这事???BB喽!
12345
2楼2013-03-22 22:09:45
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why0393

金虫 (正式写手)

这么多天没人回复,版主怎么能无动于衷呢?求帮助啊
12345
3楼2013-03-28 20:15:55
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yajing-xu

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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why0393: 金币+100, ★★★★★最佳答案, 悉数赠予 2013-04-06 11:03:03
专业性太强了,还是请教师兄吧,或者跟导师沟通一下
简单我的简单,快乐我的快乐,做真实的自己!
4楼2013-04-06 10:59:42
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yimiwyp

新虫 (初入文坛)

晋鹏: 鼓励回帖交流~ 2017-12-11 14:17:26
做出来了吗?

发自小木虫Android客户端
5楼2017-12-10 23:36:13
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