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执子之手2266

银虫 (著名写手)
送鲜花一朵
引用回帖:
10楼: Originally posted by BUU-2011 at 2013-03-23 11:23:19
据我个人经验看，加内标也是有讲究的，从你的描述看，第一个点（2），峰面积与内标峰面积之比为0.4左右，后面几个浓度的Y值应该在1、2、4、10、20、40，这样看来，与理论拟合差多少？？还有一点要提醒，液相色谱积 ...

拜谢！
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11楼2013-03-23 11:35:28
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zhangxuan200

铁杆木虫 (正式写手)
如果你测定的是生物样品的话，那你的线性可能计算的不对，应该用加权最小二乘法，权重可选择为1/x或1/x2，就是为了减少低浓度点的计算误差。
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12楼2013-03-23 16:34:28
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执子之手2266

银虫 (著名写手)
引用回帖:
12楼: Originally posted by zhangxuan200 at 2013-03-23 16:34:28
如果你测定的是生物样品的话，那你的线性可能计算的不对，应该用加权最小二乘法，权重可选择为1/x或1/x2，就是为了减少低浓度点的计算误差。

不是用excel里面那个散点图么，
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13楼2013-03-23 17:27:56
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zhangxuan200

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
13楼: Originally posted by 执子之手2266 at 2013-03-23 17:27:56
不是用excel里面那个散点图么，...

不是那个，excel那样的权重就是1。
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14楼2013-03-23 17:35:46
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zhangxuan200

铁杆木虫 (正式写手)
可以看一下这个，钟大放的文章
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15楼2013-03-23 17:38:13
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zhangxuan200

铁杆木虫 (正式写手)
以加权最小二乘法建立生物分析标准曲线的若干问题
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16楼2013-03-23 17:42:14
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joan198108

铁杆木虫 (正式写手)
一般标曲拟合的曲线往往在两端不是很准确，甚至差别较大，这是因为在拟合过程中可能两端的点偏离比较大，因此带入拟合函数后，得到的结果跟实际出入较大
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17楼2013-03-23 18:01:10
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星星的眼睛

铁杆木虫 (著名写手)
标曲中的浓度比你所要测的浓度高的点太多
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18楼2013-03-24 11:09:02
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airhblue11

银虫 (小有名气)
大概就是3个原因，楼上的各位也都提到了

1.就是你的标曲的线性范围与你样品的实际范围差异较大，比如你样品是1ng-100ng，但标曲是1ng-300ng，就会出现你的那种情况，这样的话只要重新设计标曲的浓度重做一条即可

2.可以采用加权系数的办法，不加权的话浓度高的点就回归曲线影响大，采用1/x或1/XX加权后权重会平均会，更加准确，不过可能R会稍微降低一点，可以使用简单的CurveExpert软件，小木虫上就有

3.内标峰面积不能与样品差异过大
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19楼2013-03-24 12:39:08
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执子之手2266

银虫 (著名写手)
引用回帖:
19楼: Originally posted by airhblue11 at 2013-03-24 12:39:08
大概就是3个原因，楼上的各位也都提到了

1.就是你的标曲的线性范围与你样品的实际范围差异较大，比如你样品是1ng-100ng，但标曲是1ng-300ng，就会出现你的那种情况，这样的话只要重新设计标曲的浓度重做一条即可 ...

谢谢！
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20楼2013-03-25 13:29:07
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