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pufaming

[求助] 柔嫩艾美耳球虫基因怎样才能P下来啊

我做的是艾美耳球虫基因的克隆,可是我P了好长时间了
连一点微弱的带都没有。
请问谁做过球虫的克隆,哪个环节需要特别注意啊?
使用哪个提取RNA方法最好啊?
克隆之前的如何才能纯化的很纯啊?我用饱和食盐水漂好好几次也还有杂质!
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