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千里鼠0609

铜虫 (小有名气)

[求助] 关于CTAB配制时的注意事项

各位大侠,小女子用自己配制的CTAB进行RNA的提取,可是结果很不理想,想向各位请教一下这个试剂的配制问题。
首先是提取缓冲液,氯化钠、氯化锂、EDTA都是先配成母液然后进行灭菌,然后各取适量再称CTAB和PVP加在一起,再加β-巯基乙醇,水浴加热至完全溶解,由于β-巯基乙醇的存在,米敢灭菌,然后使用·····
然后用了氯化锂,看文献中用的是10mol/L。配时是对的,但是高压灭菌时盖子不能盖很紧,会不会有溢出?有浓度上的改变?
然后是异戊醇和氯仿,这个肯定没法灭菌了······
最后是SSTE,用之前灭过菌的试剂配的,配成后米有灭菌·······
现在请各位来找茬······技术肯定是很不成熟的,还有哪些地方需要注意,配试剂时是否真的需要无菌操作?如果要,如何进行?超净工作台?我们的工作台很小,显然不够折腾,只能在外面配······
请指教!
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