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千里鼠0609

铜虫 (小有名气)

[求助] 关于CTAB配制时的注意事项

各位大侠，小女子用自己配制的CTAB进行RNA的提取，可是结果很不理想，想向各位请教一下这个试剂的配制问题。
首先是提取缓冲液，氯化钠、氯化锂、EDTA都是先配成母液然后进行灭菌，然后各取适量再称CTAB和PVP加在一起，再加β-巯基乙醇，水浴加热至完全溶解，由于β-巯基乙醇的存在，米敢灭菌，然后使用·····
然后用了氯化锂，看文献中用的是10mol/L。配时是对的，但是高压灭菌时盖子不能盖很紧，会不会有溢出？有浓度上的改变？
然后是异戊醇和氯仿，这个肯定没法灭菌了······
最后是SSTE，用之前灭过菌的试剂配的，配成后米有灭菌·······
现在请各位来找茬······技术肯定是很不成熟的，还有哪些地方需要注意，配试剂时是否真的需要无菌操作？如果要，如何进行？超净工作台？我们的工作台很小，显然不够折腾，只能在外面配······
请指教！
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1楼 2013-03-20 10:30:36
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