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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 医学 » 基础 » 从大鼠血液中分离白细胞
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山水506

铜虫 (初入文坛)

[求助] 从大鼠血液中分离白细胞

高手看过来~~我从大鼠血液中分离白细胞的步骤是：从大鼠腹主动脉取得5mL动脉血后，离心后将白细胞层移到新的离心管中，然后在新离心管里用红细胞裂解液裂解红细胞两次，最后再用PBS洗三次。
   现在的问题是，我把白细胞层肯定是移到新离心管中了，可经过后续的红细胞裂解液的裂解和PBS的洗涤后，我压根没有看到白细胞沉淀。最后只能看到，红细胞裂解生成的碎片在每一次洗涤离心后都贴在离心管壁上。
   我想请问我哪里出错了？急求，谢谢了~~
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1楼 2013-03-18 21:01:17
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tmy520

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
缩++影: 金币+2, 鼓励新虫交流 2013-03-18 21:37:34
是不是裂解不安全啊？还是你提取白细胞层时没有提出来？
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加油~
2楼2013-03-18 21:09:26
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山水506

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by tmy520 at 2013-03-18 21:09:26
是不是裂解不安全啊？还是你提取白细胞层时没有提出来？

我可以肯定白细胞层肯定是被移到新的离心管中的。红细胞裂解液，别人用没问题啊~~我就是纳闷那些裂解的红细胞碎片怎么去除，还有我的白细胞去哪了？
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3楼2013-03-18 21:25:33
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btrocky

金虫 (小有名气)

LH
红细胞裂解液裂解的时间和用量都是有要求的，裂解太过也是会破坏白细胞的
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我命由我不由天
4楼2014-04-03 21:22:15
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