24小时热门版块排行榜

新虫 (初入文坛)

[求助] 怎么能尽可能的降低RNA中的杂DNA的含量？请各位大师指点迷津啊……

提取细菌RNA后发现有DNA污染，没法进行下一步的实验，请问怎么能尽可能的降低DNA的含量？请各位大师指点迷津啊…… 我想做RT-PCR，进行共转录验证，可是阴性对照也能P出来，求指教啊！

1楼 2013-03-16 17:53:53

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

新虫 (初入文坛)

我是用试剂盒提的，但是提完之后发现有300ng/v 的DNA 用DNA酶处理完之后还有100ng左右，做完反转录做PCR可以得到目的片段，可是以RNA为阴性对照PCR 也可以得到目的片段啊？？？也就是说DNA酶处理的还是不够彻底……这个问题怎么解决啊？？？谢谢各位了。

5楼2013-03-18 13:30:59

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

新虫 (初入文坛)

引用回帖:

4楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-03-17 01:11:16
一般的核酸提取方法提出来的样品是同时含有RNA和DNA的。要用RNA逆转录的样品必需做DNase消化，一般是提完RNA后做消化后再定量逆转录。

我做了DNA消化了，但是效果不明显。DNA含量有所下降，但是还是达不到要求啊！

6楼2013-03-18 13:50:21

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

相关版块跳转我要订阅楼主 ma102389 的主题更新