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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 综合其他 » 关于毛状根的扩大培养
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Bella0224

金虫 (小有名气)

[求助] 关于毛状根的扩大培养

各位虫友们，我做的东南景天及油菜毛状根，利用的农杆菌A4，购自于中国农业微生物菌种保藏中心

一般OD为0.5~0.6转染，之后共培养2天，转移至含头孢的MS培养基继续培养，一般一周就能长出毛状根

但是毛状根长的好慢啊！我曾经用过液体MS及1/2MS，25度110rpm，一点反应也木有。。。

请问各位是怎么扩大培养的呢？按理说毛状根应该长的很快的啊，好奇怪。。。
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1楼 2013-03-13 15:29:17
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+2, 鼓励积极发帖帮助解答问题。 2013-03-13 20:07:46
Bella0224: 金币+3, ★★★很有帮助 2013-03-14 11:32:12
长得慢很可能还是培养基选择不合适，楼主不妨试试B5，SH，White，N6等等，要想获得稳定快速的培养条件，需要进行一些摸索
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植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
2楼2013-03-13 18:13:44
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wmj840613

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+2, 鼓励积极发帖帮助解答问题。 2013-03-13 20:07:51
Bella0224: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-03-14 11:32:17
xy656691: 金币+3, 感谢应助 2013-04-15 23:01:51
试着不加抗生素试试，就是容易污染。我以前是做大豆毛状根的，很好长的。
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Bella0224
每个人跑起来都是一部传奇。。。
3楼2013-03-13 18:39:42
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Bella0224

金虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by wmj840613 at 2013-03-13 18:39:42
试着不加抗生素试试，就是容易污染。我以前是做大豆毛状根的，很好长的。

请问之前也是用MS培养基么？
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4楼2013-03-14 11:35:04
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Bella0224

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by starseacow at 2013-03-13 18:13:44
长得慢很可能还是培养基选择不合适，楼主不妨试试B5，SH，White，N6等等，要想获得稳定快速的培养条件，需要进行一些摸索

好的，请问毛状根的光照是否也很重要？
实验室木有植物的恒温光照培养箱，室内温度也不高，现在只是放在摇床里摇，效果也不是很好，看文献说毛状根低于20度就长势不好
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5楼2013-03-14 11:38:36
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starseacow

专家顾问 (职业作家)
★ ★ ★ ★ ★
xy656691: 金币+5, 很好 2013-04-15 23:02:09
引用回帖:
5楼: Originally posted by Bella0224 at 2013-03-14 11:38:36
好的，请问毛状根的光照是否也很重要？
实验室木有植物的恒温光照培养箱，室内温度也不高，现在只是放在摇床里摇，效果也不是很好，看文献说毛状根低于20度就长势不好...

除了培养基以外，光照，温度，摇床转速以及装液量都会影响发根生长。我以前做黄花蒿发根，条件为25-27度，2000lx光照，16 h/d，摇床转速120 rpm，装液量一般为150 ml三角瓶装液50 ml。楼主试试按这个条件培养。
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Bella0224
植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
6楼2013-03-14 17:02:10
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Bella0224

金虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by starseacow at 2013-03-14 17:02:10
除了培养基以外，光照，温度，摇床转速以及装液量都会影响发根生长。我以前做黄花蒿发根，条件为25-27度，2000lx光照，16 h/d，摇床转速120 rpm，装液量一般为150 ml三角瓶装液50 ml。楼主试试按这个条件培养。...

谢谢这位虫友！！！

我马上去试~~~
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7楼2013-03-15 09:22:11
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wmj840613

木虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by Bella0224 at 2013-03-14 11:35:04
请问之前也是用MS培养基么？...

是的啊
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每个人跑起来都是一部传奇。。。
8楼2013-04-15 21:18:20
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