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捐助贵宾 (正式写手)

钢虫

[求助] 请教——MTT实验出现白色沉淀

每次做MTT实验溶解完甲臜后,就会发现在96孔板的底部有白色的沉淀。老板认为这样会影响吸光值的准确性。

用的是无血清培养基配的MTT,白色沉淀量比较大。应该不是一些试剂的污染。我个人感觉是死去的细胞残骸。因为甲臢是发生的氧化还原反应,并不会和构成细胞本身躯体结构的蛋白物质发生反应。

我使用的细胞是鼠脑神经细胞。不过好像以前用肿瘤细胞的时候也会出现这样的情况。

请问做MTT的各位兄弟,有没有遇到类似的情况,是如何解决的。同时也希望有识之士能给我一个合理的解释。
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bluesea1026

不建议用MTT,各类问题都很多,推荐用的cck-8替代,有国产的(如:碧云天)也不是很贵,操作方便,且对比性好。
2楼2007-08-27 12:15:07
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bluesea1026

MTT实验由于溶解性等问题,其结果并不稳定,各种问题多多,我以前做也常有许多莫名奇妙的问题,用CCK-8就都挺好,操作又方便。
3楼2007-08-27 21:29:40
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IDname

捐助贵宾 (正式写手)

钢虫

我知道,可是我的前任的数据都是MTT结果,那么我要和他的数据保持一致就必须也用MTT,不然也不会问这样的问题了。
4楼2007-08-28 08:15:12
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bluesea1026

培养基的问题吗?是液培还是干粉自配?一般根之前的实验差别大,可以先找与其培养条件的差别。我们实验室有一次细胞状态一直不太正常,后来发现是配培养基时NaHCO3加多了。
5楼2007-08-28 10:35:29
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IDname

捐助贵宾 (正式写手)

钢虫

同样的培养基其他细胞就没有白色沉淀。
6楼2007-08-28 16:29:05
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