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糖糖love妮子

银虫 (小有名气)

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[求助] 求助——木霉产葡聚糖酶的有关问题，希望高手们指点一下

小Mi 在做有关木霉菌属发酵产内切葡聚糖酶的课题，但是在发酵过程中出现了以下问题：
1. 据查阅文献发现，丝状真菌霉菌在液体发酵液中能够产生均匀的菌丝球，然后分泌胞外酶，但是经过我优化（碳源、氮源以及添加固体载体），发酵液中始终没有形成均匀的菌丝球，而是一些菌丝团，或者菌丝片段。
pS：我是将孢子悬浮液接种在种子培养基中的，在种子培养基中就没有形成菌丝球，发酵液中成菌丝球是否与种子培养基有关？
2.优化完，蛋白含量增加的不多，总蛋白含量从100mg/L提升到了500mg/L，内切酶活性提高的也不大。希望大虾们指导一下。
3. 因为以后需要做放大实验，所以我做了个上罐初试实验，就是那种7L发酵罐，装液量4L（附图）。但是菌体全都糊在发酵液上层，泡沫顶到盖子上了，加了很多消泡剂也不管用，取样管已经被堵。请教各位大虾有么有解救小米的办法？

IMG_20121104_100257.jpg

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mine

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1楼 2013-03-07 15:14:13

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fengxueping

新虫 (初入文坛)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
糖糖love妮子: 金币+15 2013-03-17 18:40:53

1、你在优化实验中出现的现象我们实验室有人也出现过，她是改变了很多载体，比如豆粕、玻璃球，最后发现玻璃球较好，但是玻璃球不能太大，要那种细小均匀的，利用较低转速的回转式或震荡式摇床培养，这样既可以不打断菌丝，也不会形成菌丝团。你可以试试。
2、如果你的菌株是自己从自然界筛选的，发酵优化效果肯定会提升不少，但是如果菌株是自己实验室早就有的，你得先确定别人是否优化过你使用的发酵配方。不然你就紫外和化学诱变一下看效果。
3、对于有菌丝体的霉菌来说，7L发酵罐，装液量4L是很高的了。我们一般装2-3 L。有菌丝体位于发酵液上层，堵塞取样管很正常，这需要你改变装液量，改换发酵罐的转轴，用那种不易打断菌丝体的有折的转轴。
不知道我说的这些对你是否有帮助，祝你实验顺利！

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2楼2013-03-08 10:04:34

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