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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 总RNA的提取
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ckk1987

禁虫 (正式写手)
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11楼2013-03-08 11:12:21
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ckk1987

禁虫 (正式写手)
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12楼2013-03-08 11:28:03
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lhs521521

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
ckk1987: 金币+2, ★有帮助, 你把你的测量浓度过程跟我说一遍，行不？ 2013-03-11 13:12:52
引用回帖:
10楼: Originally posted by ckk1987 at 2013-03-08 11:11:55
之前老板都没让我测浓度，今天做了一个，怎么比值都是5左右？太大了，完全不懂！...

不会这么大的，你调零了没？还有用什么机器测得？我们这只加1ul原液就可测出来，要不换个机器试试！
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寻找真正的自我！
13楼2013-03-08 11:29:02
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ckk1987

禁虫 (正式写手)
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14楼2013-03-08 12:53:49
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yyc12596

新虫 (著名写手)
★
gyesang: 金币+1, 鼓励交流 2013-03-13 20:04:10
gyesang: 编辑内容 2013-03-13 20:04
我个人的经验。
   （1）.抽提的RNA只有2条带，RT之后PCR可以的，我的目的条带有3000多bp,也跑得出来（当然PCR不一定每次都成功）；
   （2）我看到楼上用的Trizol。我自己当初用Trizol做了大半年实验，一直反复感冒（我们实验室有个师姐和身体很好的男生，也同样情况），即便我们每次都带口罩，通风橱操作。Trizol挥发毒性很大。
    后来我们换用了AXYGEN（50次，650元），以及Roche（50次，1300元）的RNA抽提盒，抽提效果都还可以。但是毒性较小，大家的身体都恢复正常情况了。

    如果楼上要常规抽提RNA，建议换用毒性较小的试剂。仅为个人建议。

[ Last edited by gyesang on 2013-3-13 at 20:04 ]
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15楼2013-03-08 13:32:03
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yyc12596

新虫 (著名写手)
引用回帖:
15楼: Originally posted by yyc12596 at 2013-03-08 13:32:03
我个人的经验。
   （1）.抽提的DNA只有2条带，RT之后PCR可以的，我的目的条带有3000多bp,也跑得出来（当然PCR不一定每次都成功）；
   （2）我看到楼上用的Trizol。我自己当初用Trizol做了大半年实验，一直反复感 ...

不好意思，打了一个错字。
   （1）抽提的DNA只有2条带。  应为RNA~纠正一下
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16楼2013-03-08 13:33:08
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ckk1987

禁虫 (正式写手)
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17楼2013-03-08 15:57:13
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569785797

新虫 (初入文坛)
咱们做的也就基本这样了  不过 最好有条件的情况下 做下260\280检测
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18楼2013-03-08 16:55:59
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会飞的蜗牛89

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
ckk1987: 金币+1, ★有帮助 2013-03-11 13:13:20
gyesang: 金币+1, 有益的建议 2013-03-13 20:06:11
你可以在异丙醇沉降那步，将异丙醇加入后，温和混匀，而后负二十放1小时，之后再进行后面步骤，这样试试
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19楼2013-03-08 19:12:26
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ckk1987

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20楼2013-03-08 20:40:42
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