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树蛙wagaa新虫 (初入文坛)
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[交流]
用酶联免疫斑点法检验人HLA2 Ⅰ抗体的新法
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目的:建立一种新的检测人类HLA2 Ⅰ类抗体方法———酶联免疫斑点法(ELISpot) 。 方法: 以鼠B 细胞系HB95 为模型,建立一系列特异性ELISpot检测HLA2 Ⅰ类抗体的参数,包括HLA 抗原的来源、包被抗体最适宜浓度的选择、B 细胞最适宜孵化时间,同时以经EBV 转化的敏感NTP 患者B 细胞系为干扰因素,检验该方法的敏感性和特异性。 结果:以B 细胞溶胞体作为HLA抗原来源,当抗原浓度为0125 mg/ ml 时,相同细胞密度下所获得的斑点频数均高于其它三种抗原浓度(01125、 015 和110 mg/ ml , P < 0105) ;当包被抗体浓度为118 mg/ ml 、稀释度为1∶125 时,相同孵育时间下所获得的斑点频数高于其它稀释浓度(1∶250、1∶500 和1∶1 000 , P < 0105);且在抗体稀释度相同情况下,B 细胞孵育时间为24 小时所获得的斑点最清晰、背景着色最浅、最容易被分析仪器识别。此外,当同时加入经EBV 转化的人B 细胞时,所获得的斑点频数与单纯加鼠B 细胞相似, 无明显差异( P> 0105) 结论:当B 细胞溶胞体作为HLA 抗原且浓度为0125 mg/ ml、包被抗体浓度为118 mg/ ml 且稀释度为1∶ 125、B 细胞孵育时间为24 小时时,该ELISpot 方法能特异地、敏感地、可信地检测人HLA2 Ⅰ类抗体。 本文由探生科技技术人员提供，如果您想了解更多关于抗体的信息，可以访问Fantibody全球抗体搜索引擎，您身边的抗体专家查找相关资料,希望对您有帮助！ |
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