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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 急求助，蛋白质电泳问题
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
10楼: Originally posted by liulin6904 at 2013-01-28 14:01:51
只加marker时跑出来也是这样，也是有明显的分界线，脱色时这两条分界线之间的胶很快就能脱掉颜色，...

如果marker也有，说明很可能是胶的问题或者是你的上样buffer里有什么。这两条分界线之间的距离在分离胶里距离多远，是否保持不变？
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11楼2013-01-29 01:04:42
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liulin6904

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
11楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-01-29 01:04:42
如果marker也有，说明很可能是胶的问题或者是你的上样buffer里有什么。这两条分界线之间的距离在分离胶里距离多远，是否保持不变？...

大约距离有一厘米左右，脱色后也只有四条marker的条带
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12楼2013-01-29 13:49:51
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
12楼: Originally posted by liulin6904 at 2013-01-29 13:49:51
大约距离有一厘米左右，脱色后也只有四条marker的条带...

如果是溴酚蓝上下±0.5cm，应该是蛋白分子量很小的区域了。如果是普通SDS-PAGE，这个区域的分辨率也不是很高。你的目标蛋白理论上会出现在这个区域吗？
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13楼2013-01-30 08:40:34
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yangyying

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可能是样品中含有有机溶液。
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14楼2013-01-30 09:38:41
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liulin6904

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
13楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-01-30 08:40:34
如果是溴酚蓝上下±0.5cm，应该是蛋白分子量很小的区域了。如果是普通SDS-PAGE，这个区域的分辨率也不是很高。你的目标蛋白理论上会出现在这个区域吗？...

可是脱色后只能出来四条带，电泳结束时溴酚蓝的位置颜色脱不掉，反而会更蓝，
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15楼2013-01-31 11:49:05
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
15楼: Originally posted by liulin6904 at 2013-01-31 11:49:05
可是脱色后只能出来四条带，电泳结束时溴酚蓝的位置颜色脱不掉，反而会更蓝，...

这的确不算正常。你用的是什么脱色液，是甲醇：醋酸吗？此外，上面区域的蛋白条带分辨率怎样？
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16楼2013-01-31 14:05:14
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1921952610

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
wizardfan: 金币+1, 谢谢参与 2013-02-08 07:58:38
给个图瞧瞧。。。。有图的话会比较容易判断。。。。。
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17楼2013-02-07 23:39:59
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