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zuihouyizhan

金虫 (小有名气)

[求助] 海洋细菌的抑菌试验

各位有没有做海洋细菌抑菌试验的,我用的纸片扩散法,测了60多株都没没有,是发酵液太少还是什么,求指点
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necilyx

金虫 (正式写手)

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zuihouyizhan: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-01-28 11:19:22
laozuzunzhe: 金币+5, good! 2013-01-28 19:29:36
滤纸片法抑菌,如果直接用发酵液不进行处理的话大多数情况下都很那出现理想的抑菌效果,主要是发酵液中的抑菌成分浓度太低,如果非要用滤纸片法可以把发酵液浓缩或者可以通过一些提取分离的方法把产物萃取出来再用滤纸片沾取含有产物的有机相后让有机相蒸发进行抑菌。另外的话,也可以直接将分离得到的纯菌利用琼脂柱法来筛选,这样可以不需要发酵液就能获得有抑菌效果的菌株,然后再进行发酵分析其代谢产物的抑菌成分,筛选效率更高。
聪明才智要为意外做准备~~
2楼2013-01-28 11:15:05
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zuihouyizhan

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by necilyx at 2013-01-28 11:15:05
滤纸片法抑菌,如果直接用发酵液不进行处理的话大多数情况下都很那出现理想的抑菌效果,主要是发酵液中的抑菌成分浓度太低,如果非要用滤纸片法可以把发酵液浓缩或者可以通过一些提取分离的方法把产物萃取出来再用滤 ...

琼脂柱法?怎么做,容易吗?因为我只是简单的做个抑菌性的统计,不用具体分析器抑菌成分,所以想找一种简单便捷效果还不错的的方法。哎,我是各种不懂,现在做了几批了都没有,快愁死了。你做过相关实验吗?如果方便的话想和你多交流交流,谢谢啦
3楼2013-01-28 11:23:21
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necilyx

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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zuihouyizhan: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-01-28 13:00:24
琼脂柱法是一种高通量筛选,你要买到打孔器,有几种规格的估计直径1~2cm的就差不多。对分离得到的纯菌涂布平板,当长出单菌落(注意一定要是单个菌落不能让菌落连成一片)后用灭好菌的打孔器将单个菌落打孔(同时可以用牙签沾取少量每个琼脂柱上的菌点种于另一个平板标号作为备份),将整个菌落在你打下的琼脂柱中间,再把琼脂柱倒置在刚刚涂布好的指示菌上,排列整齐,盖上盖在盖上进行标号,标号与做备份的一致,最后培养箱培养。这样只需要观察培养后的指示菌的生长情况既可以判断琼脂柱上的单菌落是否对指示菌有拮抗作用。这种方法的筛选效率较高,建议筛选选用大平板。
聪明才智要为意外做准备~~
4楼2013-01-28 12:06:40
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zuihouyizhan

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by necilyx at 2013-01-28 12:06:40
琼脂柱法是一种高通量筛选,你要买到打孔器,有几种规格的估计直径1~2cm的就差不多。对分离得到的纯菌涂布平板,当长出单菌落(注意一定要是单个菌落不能让菌落连成一片)后用灭好菌的打孔器将单个菌落打孔(同时可 ...

好的,我之后试一下,嘿嘿,非常感谢。你是做什么的方向
5楼2013-01-28 12:23:58
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necilyx

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by zuihouyizhan at 2013-01-28 12:23:58
好的,我之后试一下,嘿嘿,非常感谢。你是做什么的方向...

我是做微生物育种的,用过一些不同的高产菌株的筛选方法,主要是产抗生素类的
聪明才智要为意外做准备~~
6楼2013-01-28 12:37:34
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zuihouyizhan

金虫 (小有名气)

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6楼: Originally posted by necilyx at 2013-01-28 12:37:34
我是做微生物育种的,用过一些不同的高产菌株的筛选方法,主要是产抗生素类的...

哦,嘿嘿,那我以后有不懂得还可以请教你吧
7楼2013-01-28 12:55:32
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仙后水玲珑

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by necilyx at 2013-01-28 11:15:05
滤纸片法抑菌,如果直接用发酵液不进行处理的话大多数情况下都很那出现理想的抑菌效果,主要是发酵液中的抑菌成分浓度太低,如果非要用滤纸片法可以把发酵液浓缩或者可以通过一些提取分离的方法把产物萃取出来再用滤 ...

我用琼脂块转移法筛选的有抗菌活性的菌,为什么用同样的培养基培养条件牛津杯法就没有效果了呢?
8楼2013-04-22 10:07:00
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