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隔夜凉白开

新虫 (小有名气)

[交流] 抗体与两条互补核苷酸链连接

我现在在进行antibody & oligonucleotide conjugation 实验。实验中需要将两条相互互补的oligo退火后连接在antibody上。

由于所用试剂盒的限制，不能事先将oligo进行退火反应后再用双链连接抗体，因此我现在考虑先将一条oligo连接在抗体上，然后再将另一条互补oligo与制备好的Antibody-oligo连接产物进行退火反应。

但是我现在在考虑如果按我以上的想法操作，Antibody-oligo连接产物在退火的过程中其中的抗体会不会变性失活，进而影响我以后的免疫组化反应？

希望有高人能指点一下，万分感谢。
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1楼 2013-01-24 12:02:41
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nlbtr

铜虫 (小有名气)
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隔夜凉白开: 金币+5 2013-05-07 17:06:27
应该不影响，除非你制备抗体的抗原是蛋白而不是多肽。
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2楼2013-01-24 14:05:12
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酶切专家

金虫 (小有名气)
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隔夜凉白开: 金币+5 2013-02-26 19:45:28
隔夜凉白开: 金币+5 2013-05-07 17:05:56
你要进行退火，理论上要进行高温变性，这个过程肯定会导致抗体失活。抗体本质上上就是蛋白质，蛋白质在高温时自然会热失活（蛋白变性）
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3楼2013-01-24 21:41:45
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隔夜凉白开

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 酶切专家 at 2013-01-24 21:41:45
你要进行退火，理论上要进行高温变性，这个过程肯定会导致抗体失活。抗体本质上上就是蛋白质，蛋白质在高温时自然会热失活（蛋白变性）

谢谢。我刚刚联系试剂盒公司的技术支持，他提到了可以在室温进行退火反应，我想或许可以试一下。
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5楼2013-01-25 11:32:32
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天涯20124楼
2013-01-24 21:56   回复  
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