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隔夜凉白开

新虫 (小有名气)


[交流] 抗体与两条互补核苷酸链连接

我现在在进行antibody & oligonucleotide conjugation 实验。实验中需要将两条相互互补的oligo退火后连接在antibody上。

由于所用试剂盒的限制,不能事先将oligo进行退火反应后再用双链连接抗体,因此我现在考虑先将一条oligo连接在抗体上,然后再将另一条互补oligo与制备好的Antibody-oligo连接产物进行退火反应。

但是我现在在考虑如果按我以上的想法操作,Antibody-oligo连接产物在退火的过程中其中的抗体会不会变性失活,进而影响我以后的免疫组化反应?

希望有高人能指点一下,万分感谢。
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nlbtr

铜虫 (小有名气)


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隔夜凉白开: 金币+5 2013-05-07 17:06:27
应该不影响,除非你制备抗体的抗原是蛋白而不是多肽。
2楼2013-01-24 14:05:12
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酶切专家

金虫 (小有名气)


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隔夜凉白开: 金币+5 2013-02-26 19:45:28
隔夜凉白开: 金币+5 2013-05-07 17:05:56
你要进行退火,理论上要进行高温变性,这个过程肯定会导致抗体失活。抗体本质上上就是蛋白质,蛋白质在高温时自然会热失活(蛋白变性)
3楼2013-01-24 21:41:45
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隔夜凉白开

新虫 (小有名气)


引用回帖:
3楼: Originally posted by 酶切专家 at 2013-01-24 21:41:45
你要进行退火,理论上要进行高温变性,这个过程肯定会导致抗体失活。抗体本质上上就是蛋白质,蛋白质在高温时自然会热失活(蛋白变性)

谢谢。我刚刚联系试剂盒公司的技术支持,他提到了可以在室温进行退火反应,我想或许可以试一下。
5楼2013-01-25 11:32:32
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2013-01-24 21:56   回复  
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