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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 酶标仪使用
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查看: 2016  |  回复: 10
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609351499

银虫 (初入文坛)

[求助] 酶标仪使用

最近做实验用酶标仪测酶活，遇到了一个问题。用酶标仪测酶活，粗酶液稀释倍数不同测得的酶活不同，相差很大。稀释倍数越大，用酶标仪测得的酶活越低。因此，不知道哪种情况下的数据才是可靠的，比较接近正确值的？如果还没有听清楚，我可以举个例子来解释。酶活稀释20倍用酶标仪测得的数据是0.3左右，稀释10倍测得的数据为0.7左右，但是用酶标仪计算的时候，这些数据还得减去空白的对照，所以带入计算公式后的（A1-A2）就分别是（0.3-空白）*20，（0.7-空白）*10，这两个结果是相差很大的。请问大家这个问题怎么解决？
急！急！急！  谢谢各位了。
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加油，持之以恒
1楼 2013-01-23 19:46:11
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

137167741

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
wizardfan: 金币+2, 谢谢分享经验 2013-01-30 06:18:13
第一、酶在稀释过程中，酶的活力与并不是呈直线关系变化的；
第二、在一定的稀释倍数范围内，是可以看作是直线变化的，所以，稀释倍数不能超过这个范围的。
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总有一天我要修改用户名。
10楼2013-01-30 00:47:09
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普通回帖

sdgxz

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
首先要保证取数据的那一段曲线是直的，是这样吗？
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2楼2013-01-24 09:03:10
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0405lanfeng

新虫 (正式写手)
★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 应助指数-1, 谢谢参与，不过非应助，更偏向于交流 2013-01-27 09:20:10
我也不懂这个问题 我也遇到了，师姐跟我讲说 不用考虑空白的问题，只看读数就可以 那样就不用减去空白样品的值了。。求高人指点酶标仪原理

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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3楼2013-01-25 00:15:29
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mlanqiang

木虫之王 (文学泰斗)

蓝博士

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
至少中间一段是直的。
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蓝精灵
4楼2013-01-25 08:10:58
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zhang881007

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你的空白不对吧？正常情况下，你应该能得到直线
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shine
5楼2013-01-25 14:53:38
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dong_yue

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

梯度稀释后做标线。把偏离的点去掉应该会得到比较好的结果的
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6楼2013-01-26 19:52:56
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buggiegoat

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

有测每一稀释的蛋白值吗？如此便可说每一单位的酶蛋白所具的活性有多寡。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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7楼2013-01-26 21:19:01
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buggiegoat

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

另外，这是粗酶液，若加入纯酶液作阳性，就有所叁照了。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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8楼2013-01-26 21:23:04
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dongxie1982

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

酶标仪其实也就是一台分光光度计，主要是稀释度跟酶活是不是存在线性关系？能直接简单的相乘？
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9楼2013-01-29 21:15:36
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