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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 提鳞翅目幼虫基因组的电泳图，求指点~
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农虫

金虫 (初入文坛)

[求助] 提鳞翅目幼虫基因组的电泳图，求指点~

marker是20KB左右。提取方法是土方法——苯酚抽提。所提DNA做AFLP用
Q1.第一二个空用的是RNA酶粉（刚开始用，之前都是溶液型，因为要100mg/ml，所以买的粉~），用之前70°灭了15分钟。是不是还不达标？还有DNA酶，把我的基因组给降解了。
Q2.感觉每个样降解的这么厉害呢。是不是我的样品有问题？样品是在放置-80°C前，饥饿处理了一天（是不是太长，DNA降解了？）。
Q3.比较小的那些片段是个啥意思？

2013-1-23-15-25-03.jpg

[ Last edited by 农虫 on 2013-1-23 at 15:53 ]
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1楼 2013-01-23 15:51:57
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农虫

金虫 (初入文坛)
呃，没人回复吗？
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4楼2013-01-23 21:45:53
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yesali

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
农虫: 金币+1, ★有帮助 2013-01-23 16:14:44
我用RNA酶粗提物配RNA酶一般是沸水煮15min，70度处理15分钟，可能不太够
小片段是RNA，感觉你的RNA酶活性不够，或者是量加的太少
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2楼2013-01-23 16:07:55
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农虫

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yesali at 2013-01-23 16:07:55
我用RNA酶粗提物配RNA酶一般是沸水煮15min，70度处理15分钟，可能不太够
小片段是RNA，感觉你的RNA酶活性不够，或者是量加的太少

以前用RNA酶溶液都是10mg/ml的，要加40ul，自己配成100mg/ml的，加4ul就行了。图便宜~现在想想，耽误我的实验进度了。
赞一下 回复此楼
3楼2013-01-23 16:11:58
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ZOEY21

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
农虫: 金币+4, ★★★很有帮助 2013-01-25 16:13:52
1. RNA酶我们也是煮沸15~20min
2. 饥饿处理不还是活虫的嘛，活虫DNA会降解吗
3. 小片段是RNA吧
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6楼2013-01-25 09:26:59
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