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如何测定辣根过氧化酶(HRP)的生物活性？
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如何测定辣根过氧化酶(HRP)的生物活性？ [ Last edited by 淡淡的感觉 on 2007-8-9 at 13:41 ] |
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gkf123
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看看是你所需要的吗？如果是我再给你原文献。 预混合自组装辣根过氧化物酶生物活性膜及其催化活性研究 STUDY ON THE FABRICATION AND THE ACTIVITY OF HORSERADISH PEROXIDASE BIOFILMS SELF-ASSEMBLED BY PREMIXING METHOD <<高分子学报 >>2005年02期 江秀明 , 陈志春 , 杨绍明 , 林贤福 , JIANG Xiuming , CHENG Zhichun , YANG Shaoming , LIN Xianfu 以阳离子化的辣根过氧化物酶(HRP)和阴离子聚苯乙烯磺酸钠(PSS)的预混合溶液,与阳离子聚电解质聚二甲基二烯丙基氯化铵(PDDA)通过逐层组装,在阴离子化聚对苯二酸乙二酯(PET)表面构建了多层生物活性膜.用紫外-可见光谱仪(UV-Vis)和原子力显微镜(AFM)研究了交替自组装膜的结构和表面形膜,并测定了自组装膜的生物催化活性.结果表明 ,预混合溶液中的PSS与HRP一起沉积在PDDA膜层上组装成(PSS+HRP)膜层,且每层中PSS和 HRP的比例一致;(PSS+HRP)膜层呈条状分布,膜表面较为平整;多层膜中的HRP催化H 2O.2与4-氨基安替比林的显色反应的表观米氏常数为9.7×10-5 mol·L-1 (相对于H2O.2底物),较溶液中(1.52×10-4 mol·L-1 )的小. |
2楼2007-08-09 15:09:30
3楼2007-08-09 15:14:31
淡淡的感觉
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4楼2007-08-09 15:47:10
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5楼2007-08-09 15:47:49
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6楼2007-08-09 15:50:19
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配置反应混合液：100mmol/L 磷酸缓冲液pH6.0 50ml于烧杯中，加入愈创木酚28µl，于磁力搅拌器上加热搅拌，直至愈创木酚溶解，待溶液冷却后，加入30%过氧化氢19µl，混合均匀，保存于冰箱中。 取光径1cm比色杯2只，于1只中加入反应混合液3ml, 溶解酶液的液体1ml作为校零对照，另一只中加入反应混合液3ml，酶液0.5ml（如酶活性过高可稀释之），立即开启秒表记录时间，于分光光度计上测量吸光度值，每隔1分钟读数一次，读数于波长470nm下进行。以每分钟吸光度变化值表示酶活性大小，即以△A470/min表示之。或是以底物的消耗量表示 |
7楼2007-08-09 19:28:30
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淡淡的感觉(金币+1,VIP+0):3Q!
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Wu F.B., Zhang G.P., Dominy P. Four barley genotypes respond differently to cadmium: lipid peroxidation and activities of antioxidant capacity. Environmental and Experimental Botany, 2003, 50:67 -78 张志良,植物生理学实验指导[M]. 北京.高等教育出版社.1990,2:154-155 我是做植物的HRP活性测定，但我觉得原理应该是一样的。 |
8楼2007-08-11 13:09:13
