应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 有谁用过NdeI和XhoI，请教大侠指点，用这两种酶要切多长时间。
61/1返回列表
查看: 2372  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

lezhen_22

铁虫 (初入文坛)

[求助] 有谁用过NdeI和XhoI，请教大侠指点，用这两种酶要切多长时间。

听说NdeI和XhoI这两种酶很难切，是不是真的呢，本人在用这两种酶进行双酶切质粒PET28C，不知道该切多长时间比较合适。如能给出双酶切体系那就更好了。
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2013-01-21 17:01:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

raindick1231

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
lezhen_22: 金币+1, ★有帮助 2013-01-21 19:41:24
我用的Neb的  差不多2h-4h，buffer 和温度都相同
质粒用试剂盒抽的，浓度挺高，25ul体系里面加了5ul
一般的双酶切而已，别紧张，能出来就成，祝好运！
赞一下 回复此楼
2楼2013-01-21 17:38:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snoopyzxx

木虫 (著名写手)
我长期用这两个酶双酶切。3小时。没有问题。
赞一下 回复此楼
生物资源交流QQ群：1044518333
3楼2013-01-21 18:32:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lezhen_22

铁虫 (初入文坛)
本人是初学者，还想问的是，一般应该用多少ml的菌液，才能使得提取的质粒浓度高，以便后面进行双酶切，割胶回收载体，与目的基因连接。
赞一下 回复此楼
4楼2013-01-21 19:48:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guojianping

木虫 (正式写手)
3ml去抽提质粒足够了，如果想浓度高，用手提，试剂盒也行，没问题的，这两个酶都是常用的，NEB的话2小时足够。
赞一下 回复此楼
5楼2013-01-21 22:16:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

酶切专家

金虫 (小有名气)
新手可以用doule digestion designer, 小木虫上可以搜到，很方便，可以根据你的实际情况，帮你设计双酶切。good luck.
赞一下 回复此楼
6楼2013-01-21 22:59:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 lezhen_22 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 277材料科学与工程080500求调剂 +3 自由煎饼果子 2026-03-16 3/150 2026-03-16 14:10 by 运气yunqi
[考研] 梁成伟老师课题组欢迎你的加入 +6 一鸭鸭哟 2026-03-14 7/350 2026-03-15 22:12 by Winj1e
[考研] 289求调剂 +5 步川酷紫123 2026-03-11 5/250 2026-03-15 00:45 by kruisytel
[考研] 268求调剂 +5 一定有学上- 2026-03-14 6/300 2026-03-14 22:20 by 运气yunqi
[考研] 290求调剂 +4 @将就将就看 2026-03-10 8/400 2026-03-14 14:23 by 千千运气
[考研] 学硕285求调剂 +13 Wisjxn 2026-03-12 46/2300 2026-03-14 10:33 by JourneyLucky
[考研] 一志愿天津大学，英一数二305分求调剂，四六级已过 +8 小小番的茄 2026-03-09 8/400 2026-03-14 01:53 by JourneyLucky
[考研] 一志愿湖师大化学289求调剂 +6 XMCMM3.14159 2026-03-10 6/300 2026-03-14 00:28 by JourneyLucky
[考研] 材料与化工（0856）304求B区调剂 +6 邱gl 2026-03-12 7/350 2026-03-13 23:24 by 邱gl
[考研] 求材料调剂 085600英一数二总分302 前三科235 精通机器学习 一志愿哈工大 +4 林yaxin 2026-03-12 4/200 2026-03-13 22:04 by 星空星月
[考研] 285化工学硕求调剂（081700） +6 柴郡猫_ 2026-03-12 6/300 2026-03-13 20:46 by hmn_wj
[考研] 材料专硕350 求调剂 +4 王金科 2026-03-12 4/200 2026-03-13 16:02 by ruiyingmiao
[考研] 085600材料与化工 309分请求调剂 +7 dtdxzxx 2026-03-12 8/400 2026-03-13 14:43 by jxchenghu
[考研] 304求调剂（085602一志愿985） +12 化工人999 2026-03-09 12/600 2026-03-13 12:02 by JourneyLucky
[考研] 270求调剂 085600材料与化工专硕 +3 YXCT 2026-03-11 3/150 2026-03-13 10:13 by houyaoxu
[考博] 福州大学杨黄浩课题组招收2026年专业学位博士研究生，2026.03.20截止 +3 Xiangyu_ou 2026-03-12 3/150 2026-03-13 09:36 by duanwu655
[考研] 341求调剂 +4 捣蛋猪猪 2026-03-11 4/200 2026-03-12 14:47 by ruiyingmiao
[考研] 研究生招生 +3 徐海涛11 2026-03-10 7/350 2026-03-12 14:26 by 徐海涛11
[考研] 一志愿江南大学085701环境工程专硕总分287求调剂 +5 18266118446 2026-03-09 5/250 2026-03-11 16:51 by 2020015
[考研] 0857环境调剂 +5 熠熠_11 2026-03-10 5/250 2026-03-11 10:59 by wang_dand
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭