应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台» 网络生活区» 有奖问答 » 有奖问答完结子版 » PCR之前能扩出来，后来再做却扩不出来，求高手指教！！！
51/1返回列表
查看: 905  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 1 个 博学EPI ，点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

sunchenli

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR之前能扩出来，后来再做却扩不出来，求高手指教！！！

我自己设计的一对引物，同样的反应体系，同样的PCR循环参数，先前做几次都能扩出来，后来再做却扩不出来了，不管换什么样的条件，总是什么条带都没有。我只有13个金币，都拿出来了，跪求各位PCR高手指教啊，谢谢了啊！！
附引物序列：上：GCATCGCCAACTTCTTCC
                     下：CCCGCTGTTCTTCTTGC
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-01-21 16:10:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunchenli

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by yang1279 at 2013-01-22 11:20:47
楼主做实验要做对照啊 这样很容易找出是什么原因（模版，引物还是体系都能找出来）

我的不需要对照，因为是自己设计的引物，模板也是已知的阳性，能扩出来就扩出来，不能也就不能了，有无对照并无关系
赞一下 回复此楼
8楼2013-01-22 16:45:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

sunchenli

新虫 (初入文坛)
补充一下，我的引物放了已经有差不多半年了，是宝生物合成的，我再想问下，这么长时间引物会不会出问题了？？？？
赞一下 回复此楼
2楼2013-01-21 16:13:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mzchongchong

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

你的引物如果正确的存放在-20度，半年的时间应该不会有问题的.
我之前跟你遇到的问题一样，换了另一种聚合酶，然后就得到了目的条带，建议你换一种聚合酶试试.
赞一下(1人) 回复此楼
You'renevertoooldtolearnsomethingstupid.
3楼2013-01-21 18:19:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunchenli

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by mzchongchong at 2013-01-21 18:19:33
你的引物如果正确的存放在-20度，半年的时间应该不会有问题的.
我之前跟你遇到的问题一样，换了另一种聚合酶，然后就得到了目的条带，建议你换一种聚合酶试试.

再请问下，引物一般最多能反复冻融几次？我的引物已经被我冻融过4-5次了，会降解吗？
赞一下 回复此楼
4楼2013-01-22 09:47:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 26年申博自荐-计算机视觉 20+3 光亮我自己 2026-05-01 4/200 2026-05-03 09:01 by lfy8008
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 qs8kylt1wr 2026-05-01 4/200 2026-05-03 07:19 by jmr1kibhvw
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 qs8kylt1wr 2026-05-01 4/200 2026-05-03 06:52 by jmr1kibhvw
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 qs8kylt1wr 2026-05-01 3/150 2026-05-03 06:34 by jmr1kibhvw
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 d8tbypao1q 2026-05-01 3/150 2026-05-03 06:04 by jmr1kibhvw
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 d8tbypao1q 2026-05-01 4/200 2026-05-03 05:49 by w5idbsc3mz
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 d8tbypao1q 2026-05-01 3/150 2026-05-03 05:07 by jmr1kibhvw
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 d8tbypao1q 2026-05-01 4/200 2026-05-03 05:04 by jmr1kibhvw
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 d8tbypao1q 2026-05-01 4/200 2026-05-03 03:51 by w5idbsc3mz
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 k17zww5nna 2026-05-01 4/200 2026-05-03 03:19 by w5idbsc3mz
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 k17zww5nna 2026-05-01 4/200 2026-05-03 03:04 by w5idbsc3mz
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 k17zww5nna 2026-05-01 5/250 2026-05-03 01:49 by w5idbsc3mz
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 k17zww5nna 2026-05-01 4/200 2026-05-03 01:34 by w5idbsc3mz
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 qs8kylt1wr 2026-05-01 3/150 2026-05-02 15:51 by zahslv263y
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 qs8kylt1wr 2026-05-01 3/150 2026-05-02 15:06 by zahslv263y
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 k17zww5nna 2026-05-01 3/150 2026-05-02 09:36 by dz7y1p1i98
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 k17zww5nna 2026-05-01 5/250 2026-05-02 09:21 by dz7y1p1i98
[有机交流] 一个化合物的合成路线：CAS:367929-02-0 名称：8β-乙烯基雌二醇 50+4 zhquanbing 2026-04-28 4/200 2026-04-30 22:45 by zyqchem
[文学芳草园] 太白金星有点烦 +3 yexuqing 2026-04-27 3/150 2026-04-30 21:56 by myrtle
[考博] 中国地质大学（北京）博士招生补录，数理学院材料科学与工程专业和材料与化工专业 +3 liuxh329 2026-04-29 3/150 2026-04-30 15:42 by 顺利毕业zs
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭