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pangweigui

木虫 (小有名气)

[求助] 蔗糖梯度离心后如何除糖？

蛋白提纯或者病毒粒子提纯时如果采用蔗糖梯度离心，离心后如何除糖？求具体步骤！急急急
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贵在持之以恒
1楼 2013-01-18 09:16:58
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liusir3836

木虫 (职业作家)

猎手

优秀版主

【答案】应助回帖

你好！你可以看看这个帖子https://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=3933844，可能对你有用！
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态度确定行为
2楼2013-01-18 09:37:14
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pangweigui

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by liusir3836 at 2013-01-18 09:37:14
你好！你可以看看这个帖子https://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=3933844，可能对你有用！

这个看过了，我的是病毒粒子，而且需要提纯的蛋白也是纳米级的，简单的离心不能用啊！梯度离心已经做了，就是不知道离心后怎么有效的去除蔗糖
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贵在持之以恒
3楼2013-01-18 10:00:48
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liusir3836

木虫 (职业作家)

猎手

优秀版主

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by pangweigui at 2013-01-18 10:00:48
这个看过了，我的是病毒粒子，而且需要提纯的蛋白也是纳米级的，简单的离心不能用啊！梯度离心已经做了，就是不知道离心后怎么有效的去除蔗糖...

好的！这个你再等等后面的人给你些建议啊，这方面我没做过！你也可以去生物专版发帖交流！
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态度确定行为
4楼2013-01-18 10:48:50
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noheart2179

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你取得是蔗糖梯度离心得第几层啊？然后根据缓冲液得比例再做一次离心不就去掉蔗糖了么？实在没办法得话，可以用差速离心（具体名字我可能记的不太准确），按照分子的大小逐步离心下来，分段收集就可以了啊，你的蛋白是纳米级的话应该是最后得到的那部分的收集物的。
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如果有来生，请与我擦肩而过
5楼2013-02-26 21:38:41
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hainblue

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
pangweigui: 金币+2, 博学EPI+1, ★★★很有帮助, 这倒是个办法，谢啦 2013-07-27 10:26:35
我们做密度梯度离心以后取目的层病毒，然后用PBS稀释，稀释以后离心除去上清，用相应的溶液悬浮就可以了。
也可以用tris缓冲液稀释蔗糖提取层，然后再离心除去上清，用相应的缓冲液悬浮。
选取稀释液和重悬的缓冲液根据后期实验而定，有些实验不能用PBS悬浮的。
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6楼2013-03-10 18:37:31
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