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hengyue5257木虫 (著名写手)
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如何用Real-time 检测投加反应器后的纯菌
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| 我们已经获得一株纯菌，想投加到原反应器中看这株菌能否提高反应器的处理能力。想通过Real-time PCR来检测这株菌在反应器的变化。怎么来做，比如如何设计引物，采用什么标记；采用相对定量还是绝对定量。之前没有做过，所以问题较多，请大家帮助。 |
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
hengyue5257: 金币+20 2013-01-18 20:47:32
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hengyue5257: 金币+20 2013-01-18 20:47:32
| real time pcr是对某一基因的表达高低来分析的，是基因水平的研究，听楼主说想要检测菌株在反应器的变化，个人觉得应该首先选取几个与菌株生理变化相关的基因来研究，比如微生物衰亡相关的，细胞分裂相关的等等，然后设计每一个基因的引物（prime5.0设计），优化基因的扩增体系，最后可以用SYBR GREEN法或者探针法进行rt PCR，数据分析建议还是相对定量法好一些，常用2-ΔΔct法。 |
2楼2013-01-18 14:29:16
hengyue5257
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6楼2013-01-19 22:24:54