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和阈尚

金虫 (初入文坛)

[求助] 求助:谁给解释下紫外分光光度法测蛋白质含量的公式是怎么来的

用测蛋白质含量,查文献上有个差值法,就是用280nm的吸光度减去260nm的吸光度,但是那个公式是
        蛋白质含量=1.45A280-0.72A260 (A280 A260为在280nm和260nm处的吸光度)
我想问下那1.45和0.72是怎么来的,
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zzjcust

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
和阈尚: 金币+20, ★★★很有帮助, 希望有更详细的解答, 2013-01-11 08:41:58
有嘌呤、嘧啶等核酸类干扰时的经验公式:若样品中含有嘌呤、嘧啶等核酸类吸收紫外光的物质,在280nm处来测量蛋白质含量时,会有较大的干扰。核酸在260nm处的光吸收比280nm更强,但蛋白质却恰恰相反,因此可利用280nm及260nm的吸收差来计算蛋白质的含量。常用下列经验公式计算:

               蛋白质浓度(mg/mL)=1.45A280-0.74A260

另外,这个化工即然是经验公式,就不是靠推导来了,可能是根据大是数据总结而来的
2楼2013-01-11 07:52:20
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