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will-jiang

金虫 (初入文坛)

[求助] 关于镍磁珠的复性

想要回收提取蛋白后的镍磁珠,再次提取蛋白,是直接使用呢,还是要复性?
复性的话是跟镍磁柱的原理一样么,加入还有镍离子的溶液中就行,还是有什么特殊的处理方式呢?
请有这方面经验的高人指点,感激不尽~
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zhang881007

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
will-jiang: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-01-06 22:00:27
我建议你复性后使用,否则可能效率下降。具体地看你产品的厂家说明,他们的条件最不会影响产品的效率。
shine
2楼2013-01-05 11:12:50
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will-jiang

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zhang881007 at 2013-01-05 11:12:50
我建议你复性后使用,否则可能效率下降。具体地看你产品的厂家说明,他们的条件最不会影响产品的效率。

哦,谢谢啦,不过厂家的说明书没有提到复性的问题啊,请问一般是怎么给镍磁珠复性呢,使用硫酸镍溶液么?
3楼2013-01-05 18:54:21
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
will-jiang: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-01-06 22:00:52
wizardfan: 金币+2, 鼓励发帖交流 2013-01-07 07:50:31
如果是做同样的蛋白的话,不用复性直接稍微洗洗就接着用。如果是做不同蛋白,可以用2%SDS洗去残留蛋白,再用乙醇梯度洗。反复用几次后磁珠可能效率变差,可以复性。复性时可以用EDTA完全除去结合的镍,然后上NiSO4,再用水洗掉多余的镍。
4楼2013-01-06 14:33:08
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will-jiang

金虫 (初入文坛)

wizardfan: 鼓励继续发帖描述实验结果 2013-01-07 07:50:19
引用回帖:
4楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-01-06 14:33:08
如果是做同样的蛋白的话,不用复性直接稍微洗洗就接着用。如果是做不同蛋白,可以用2%SDS洗去残留蛋白,再用乙醇梯度洗。反复用几次后磁珠可能效率变差,可以复性。复性时可以用EDTA完全除去结合的镍,然后上NiSO4, ...

哦。。。明白了,多谢指点,明天我就去试试!
5楼2013-01-06 22:00:08
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