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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 转化子太多假阳性，怎么办呀？
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cdmmore

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by chenyuqin at 2013-01-04 09:31:27
我想有两个问题吧：首先是酶切不完全，在确保内切酶好使的情况下，LZ可以减少质粒量，最好在酶切之前先把质粒高温煮2分钟然后冰浴使质粒变性；其次连接时掌握好大片段小片段的比例。
祝LZ好运！

谢谢呀！请问您是多少温度煮质粒呢？您这样操作之后是不是酶切更彻底了？
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11楼2013-01-04 13:08:26
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cdmmore

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by ccharlien at 2013-01-03 21:50:01
说明你pET28a的酶切不完全
所以转化出的大多是空的
减少空载体的量 确保酶切时间

谢谢
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12楼2013-01-07 16:49:24
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