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红虫梦

新虫 (初入文坛)

[求助] bradford

请问，bradford法测量蛋白浓度，G250与蛋白标准品放置于室温多少时间，就可以用酶标仪测量标准曲线。我每次测的时候都复孔的值变化太大，标准曲线r平方只有0.97左右。不知道为什么？
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【分子生物】EPI帖

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梦想
1楼 2012-12-31 11:25:39
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Poincare2010

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
amisking: 金币+3, MolEPI+1, 鼓励发帖交流问题。 2012-12-31 22:24:32
引用回帖:
2楼: Originally posted by Poincare2010 at 2012-12-31 12:33:26
理论上讲bradford法建议5分钟后开始测定，5-30min内数值稳定。但是由于考马斯亮蓝用前需要过滤等因素的影响，我一般放在10min后测定，

建议你测定时同时做3个平行样，求平均值（不出意外，肯定一个偏离比较大的，我不知道为何，但是以前经常遇到）。同时考马斯亮蓝要过滤后使用。这两点足可以保证你的R值达到0.98以上，当然0.995难度比较大，起码我没做出来过
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3楼2012-12-31 12:36:29
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Poincare2010

银虫 (小有名气)
理论上讲bradford法建议5分钟后开始测定，5-30min内数值稳定。但是由于考马斯亮蓝用前需要过滤等因素的影响，我一般放在10min后测定，
赞一下 回复此楼
2楼2012-12-31 12:33:26
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