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waiting_yang

铜虫 (初入文坛)

[求助] 关于蛋白结合在硝酸纤维素膜上的问题,求帮助。谢谢

各位虫友:最近做实验遇到难题了,在做一个蛋白包被试验,想将一定浓度麦胚凝集素(WGA,蛋白)点在NC膜(硝酸纤维素膜)上,37度干燥进行固定。通过凝集素吸附显色物质做显色试验。
现在问题出来了,蛋白不能很好的固定在膜上,做的显色实验,显色斑点很不均匀,中间显色淡,斑点边缘显色深。有的甚至没有斑点,只看到模糊的一团色块。直观看像是WGA蛋白没有固定于膜上,用缓冲液一冲就冲掉了。显色不均匀的好像是WGA蛋白点在膜上的时候扩散了。
由于很少接触这两样东西,找不到关键点取解决这个问题。
哪位虫友有做过类似的试验,或者用过WGA和NC膜的虫友,在用的过程中有没有什么特别需要注意的,求交流。谢谢。。
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