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小尾巴

新虫 (初入文坛)

[求助] 请教PFGE的高手一个问题,帮帮忙啊

我正在做脉冲场凝胶电泳PFGE分离链霉菌的染色体(AseI酶切),其中有几个大片段,1200kb,1100kb,1050kb老是走在一起,无法分开。我尝试过0.8% agarose, 4.5v/cm, 120s 24h, followed by 240s 24h. 还是没有把他们分开。我在分离某些大小的片段的时候,条件基本上都靠经验,也就是试。目前就有一个总的依据,分大片段转换时间长些,小片段时间小些,但还没有一个很整体的数据化的依据。想请教一下脉冲高手,分享一下您的经验好吗?

我的email :chenweinannan@126.com 中国农大博一

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