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求助：测定多糖的蒽酮比色法的具体步骤是什么？
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| 我现在需要测定溶液中的多糖浓度，在网上查到应该用蒽酮比色法来做，但没有具体步骤以及溶液的浓度的配方，望哪位做过这方面的高手给指导一下，非常感谢！ |
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蒽酮比色法
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whxhxq(金币+2):3ks！
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蒽酮比色法，糖在硫酸的作用下生成糖醛，糖醛再与蒽酮作用，形成一种绿色的络合物，颜色的深浅与糖含量有关。 1. 葡萄糖标准溶液：称取已在80℃烘箱中烘至恒重的葡萄糖100mg，配制成500ml溶液，即得每ml含糖为200μg的标准溶液。 蒽酮试剂：称取1g经过纯化的蒽酮，溶解于1000ml稀硫酸中即得。硫酸溶液由760ml浓硫酸（比重1.84)稀释成1000ml而成。 2．显色及比色 吸取上述糖提取液1ml，放入一干洁的试管中，加蒽酮试剂5ml混合之，于沸水浴中煮沸10分钟，取出冷却，然后于分光光度计上进行测定，波长为625nm，测得吸光度。从标准曲线上查得滤液中的糖含量（或经直线回归公式计算），然后再行计算样品中含糖百分数。 3．绘制标准曲线 取标准葡萄糖溶液将其释成一系列不同浓度的溶液，浓度分别为每ml含糖0、5、10、20、30、40、50、60、70、80、90、100μg。按上述方法分别测得其吸光度，然后绘制A026－糖浓度曲线，或进行直线回归求得直线方程。 4．计算样品中含糖% 设V为植物样品稀释后的体积(ml) C为提取液的含糖量(μg/ml) W为植物组织鲜重(g) 则得计算式如下：可溶性糖含量% =C×V/W×106 ×100% |
2楼2007-07-25 08:27:15
蒽酮比色法
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蒽酮比色法，糖在硫酸的作用下生成糖醛，糖醛再与蒽酮作用，形成一种绿色的络合物，颜色的深浅与糖含量有关。 1. 葡萄糖标准溶液：称取已在80℃烘箱中烘至恒重的葡萄糖100mg，配制成500ml溶液，即得每ml含糖为200μg的标准溶液。 蒽酮试剂：称取1g经过纯化的蒽酮，溶解于1000ml稀硫酸中即得。硫酸溶液由760ml浓硫酸（比重1.84)稀释成1000ml而成。 2．显色及比色 吸取你所提取多糖溶液1ml，放入一干洁的试管中，加蒽酮试剂5ml混合之，于沸水浴中煮沸10分钟，取出冷却，然后于分光光度计上进行测定，波长为625nm，测得吸光度。从标准曲线上查得滤液中的糖含量（或经直线回归公式计算），然后再行计算样品中含糖百分数。 3．绘制标准曲线 取标准葡萄糖溶液将其释成一系列不同浓度的溶液，浓度分别为每ml含糖0、5、10、20、30、40、50、60、70、80、90、100μg。按上述方法分别测得其吸光度，然后绘制A026－糖浓度曲线，或进行直线回归求得直线方程。 4．计算样品中含糖% 设V为样品稀释后的体积(ml) C为提取液的含糖量(μg/ml) W为样品干重(g) 则得计算式如下：可溶性糖含量% =C×V/W×106 ×100% |
3楼2007-07-25 08:34:13
4楼2007-07-25 15:09:25