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Christine26

木虫 (小有名气)

[求助] 细胞培养液变紫色,澄清,有气味,细胞长得慢

大家好!我是刚刚开始做细胞的。
我的细胞复苏当天在放入培养箱之前观察长得比较满,没有贴壁,第二天在镜下观察细胞仍然有很多没有贴壁,而且长满90%左右,而且培养液呈玫瑰紫色且澄清,打开有一股气味担不是污染后的臭味。用消化液在37摄氏度的培养箱中用Trypsin消化1分半后,一传三后,加入培养液放入培养箱中培养,很快就变为紫色,且澄清。
我问了学姐,他说颜色不正常,因为我们用的是DMEM+FBS(9:1),颜色是红色的。但是又没有变浑浊,只是细胞长得慢。学姐说是瓶子拧太紧,CO2不够所致。
注:DMEM用的新打开的,FBS过滤了,严格按照操作进行——因为以前染过菌,所以实验室刚消过毒,而且实验很谨慎。
现在想问一下高手,这种原因是不是因为CO2的缘故,而不是染菌,因为有一股气味,担不是臭味,而且是培养液为澄清的。
谢谢~~
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448935271

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
amisking: 金币+3, 回答的非常专业! 2012-12-20 20:35:27
培养液中有指示剂,ph值较高时会变成玫瑰紫,里面还有缓冲剂,当有CO2进入时,综合会返回红色,你1传3后,每个瓶里的细胞量明显减少,呼吸作用也就没有原来强了,CO2少自然变紫得快,所以放入CO2培养箱后最好将培养瓶拧松半圈,让CO2能够进去
万物皆有毒,只要剂量足
2楼2012-12-20 16:51:21
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448935271

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

amisking: 回帖置顶 2012-12-20 20:35:30
细胞的最是生长环境在PH=7-7.35附近,当然不同组织的细胞ph会相差不少,ph不正常当然细胞就会长得慢了,我不知道我的解释是不是你所需要的
万物皆有毒,只要剂量足
3楼2012-12-20 16:53:40
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hylee103

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
也有可能是支原体污染,而不是细菌污染。
4楼2012-12-20 18:00:04
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